兩塊膠蛋白迷你垂直電泳槽
參考價 | ¥ 3195 |
訂貨量 | ≥1 只 |
- 公司名稱 翌圣生物科技(上海)股份有限公司
- 品牌 Yeasen/翌圣生物
- 型號
- 產地 上海
- 廠商性質 生產廠家
- 更新時間 2023/2/16 15:19:47
- 訪問次數 369
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供貨周期 | 現貨 | 規格 | 1臺 |
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貨號 | 80210ES05 | 應用領域 | 醫療衛生,化工,生物產業 |
產品信息
產品名稱 | 產品編號 | 規格 | 價格 | * |
PET2迷你垂直電泳槽 | 80210ES05 | 套 | 3755 | 3195 |
產品描述
翌圣 PET2迷你垂直電泳槽操作手冊可運行市場多個品牌的預制膠和手灌膠,最多可2塊凝膠同時運行;兼容1-D垂直和2-D雙向電泳應用。配件齊全,滿足制膠及電泳所有環節,也使得手灌膠變得簡便快捷。
結構信息
配件 | 示意圖 | 說明 |
帶固定邊條玻璃板 箭頭 |
| 較高并帶固定邊條的玻璃板。邊條厚度0.75;1.0;1.5 mm 3種。 |
短玻板 箭頭 | 較短的平玻璃板。與帶固定邊條的玻璃板組合成凝膠三明治夾。 | |
凝膠夾組件 | ||
凝膠三明治 | 主要是灌好膠的玻璃板。 | |
電泳芯 | 把持凝膠三明治,并提供U型密封墊以及上、下電極和電極連接插頭。正極以紅色表示,負極以黑色表示。 | |
緩沖液槽與上蓋 | 緩沖液槽與上蓋閉合以確保電泳正常進行,上蓋打開即切斷電路。槽與上蓋同時兼容其它電泳模塊,如:轉移電泳、2-D 的第一向電泳、電泳洗脫等等。 | |
灌膠框 | | 無需放置于桌面上,灌膠框本身有水平定位結構,可使帶邊條玻璃板和短玻璃板在底部對齊,確保其組成凝膠三明治夾。 |
制膠底座 | | 壓力杠桿使凝膠組件密封于灌膠墊上,保證凝膠夾組件在灌膠時不漏膠。 |
操作指南
1. 凝膠版準備:
1) 正確放置保證灌膠框水平于操作臺上,并打開灌膠框手柄;按所需凝膠厚度選擇邊條玻璃板,將短玻璃放置其上;帶邊條玻璃板的標記端向上,將兩塊玻璃板滑入灌膠框與水平定位結構(紅圈)對齊,使短玻璃板一面朝向前方(圖1,A)。【注】:確認標記方向正確;玻璃板方向錯誤或者未對齊會造成漏膠。
2) 玻璃板到位后關閉灌膠框手柄,將玻璃板夾緊在灌膠框中,并檢查玻璃板底部是否平齊(圖1,B)。
3) 保持灌膠框手柄關閉,將灌膠框放置于制膠底座的制膠密封墊上。同時將凸輪杠桿壓在帶邊條的玻璃板上(圖1,C)。
4) 重復上述步驟可制作另一塊膠板。
A B C
圖1 凝膠板準備
2. 灌膠:
不連續聚丙烯酰胺凝膠
1) 預先可將梳子*放入組合好的凝膠夾中,在梳齒下端 1 cm處作標記。用來粗略估計分離膠添加高度;
2) 混合所有試劑來制作分離膠單體溶液。將溶液注入玻璃板之間至標記處。注入溶液時須平穩以防止其與空氣混合;立即以水或者異丙醇覆蓋溶液表面。注意:如果用水覆蓋須小心緩慢平穩加入以防與溶液混合;
3) 放置45 min到1 h使凝膠聚合(或者根據不同品牌的配膠試劑盒要求,進行判斷凝膠情況)。可用雙蒸水*清洗凝膠表面。不要讓醇類物質在膠上超過1小時以防止上部凝膠脫水;
4) 準備濃縮膠單體溶液。注入濃縮膠溶液前用濾紙使分離膠表面干燥;將溶液注入玻璃板之間直至與短玻璃板平齊;在邊條之間從上部插入所需的梳子,確認梳子兩端突起在邊條之間引導,*插入直至梳子背脊與短玻璃板對齊;
5) 放置30-45 min使濃縮膠聚合(或者根據不同品牌的配膠試劑盒要求,進行判斷凝膠情況);
6) 輕輕取出梳子并以蒸餾水或緩沖液*清洗凝膠表面。以蒸餾水,去離子水清洗用過的灌膠架和制膠底座。
連續聚丙烯酰胺凝膠
1) 混合所有試劑來制作凝膠單體溶液,將溶液注入玻璃板之間直至與短玻璃板平齊;
2) 在邊條之間從上部插入所需的梳子,確認梳子兩端突起在邊條之間引導。*插入直至梳子背脊與短玻璃板對齊;
3) 放置45 min到1 h使凝膠聚合(或者根據不同品牌的配膠試劑盒要求,進行判斷凝膠情況);
4) 輕輕取出梳子并以蒸餾水或緩沖液*清洗凝膠表面;
5) 以蒸餾水,去離子水清洗用過的夾膠框和制膠架。
3. 電泳模塊組裝與上樣所需材料:
1) 準備潔凈干燥的電泳緩沖液槽;電泳芯模塊(1個電泳芯模塊只能用于1或2塊膠,做3或4塊膠需要2個模塊);電泳緩沖液(1-2塊膠700 mL;3-4塊膠1,000 mL);
【注】:只運行2塊膠時只需使用電極插頭的電泳芯。運行4塊膠時,電極插頭的電泳芯和蘑菇頭電泳芯均要使用,每個組件2塊膠。
2) 打開灌膠架并放置于干凈平整操作臺上(圖2,A);
3) 將第一塊凝膠三明治以短玻璃板朝內側放置于凝膠支撐架上,凝膠支撐架模鑄于組件底部且每側均有兩個。放置第一塊膠時須小心確認夾膠框保持平衡狀態不會翻倒。在另一側凝膠支撐架上放置第二塊膠,共有兩塊膠相對中心傾斜;如果運行奇數膠(1或3塊膠),則須使用緩沖液擋板(圖2,B);
4) 同時將2塊膠板向中心捏緊,使膠板緊貼密封條,并且需短玻璃板頂住密封條臺階;然后雙手同時向內合攏兩側的邊卡,使其鎖定到位;邊卡會推動膠板使短玻璃板緊貼U型密封條的凹槽,以防止漏液(請確認短玻璃板沒有壓住密封條臺階)(圖2,C);
5) 此時可以用緩沖液清洗樣品孔和上樣(圖2,D),請不要嘗試在膠板壓住密封條臺階時合攏夾膠框夾;
【注】:只運行1-2塊膠時請不要把蘑菇頭電泳芯放入電泳儀中,那樣做會產生額外的熱,影響電泳分離效果。
4. 蛋白上樣:
1) 向電泳槽中注入電泳緩沖液,外槽至外玻璃板上沿之下,內槽加滿;
2) 樣本可在電泳芯被放入電泳儀之前或之后進行;
3) 使用注射器或加樣槍將樣品加入樣品孔中(加樣孔體積可參考附件1)。
【注】:加樣時應緩慢使樣品均勻沉降于樣品孔底部。注意不要用針頭或加樣器頭刺破膠孔底部;正極和負極均需注入緩沖液,建議正負極緩沖液的液面等高。
5. 在緩沖液槽中放置電泳模塊:
【注】:所需緩沖液體積:2塊膠700 mL;4塊膠1,000 mL;緩沖液槽具有兩個位置可放置兩個模塊:帶插頭電泳芯在后,蘑菇頭電泳芯在前。
1) 首先把緩沖液槽放置于平整桌面上,使正面(具2-Gels 和4-Gels標記的那一面)朝前。如果方向正確,槽邊緣的紅色標記應該在右邊,黑色標記在左邊;
2) 如果只運行2塊膠則只需用帶插頭電泳芯,將其放在后部位置上使得紅色(+)極與槽右側的紅色標記相對應;
3) 如需做4塊膠,除放入帶插頭電泳芯外,還要將蘑菇頭電泳芯放入前部位置。確認兩者的紅色(+)極與槽右側的紅色標記相對應。注意,位置和方向的錯誤會使上蓋無法蓋合;
4) 在緩沖液槽中加入緩沖液至標記位置。
6. 緩沖液槽裝配:
將上蓋蓋在緩沖液槽上。確認顏色標記的插頭與插座相對應,插頭、插座的匹配可以使定位準確,上蓋上的障礙物可以防止定位錯誤。注意,緩沖液槽兩側的尖突出部分應該從上蓋的狹縫中穿出,以保證上蓋的正確閉合。此時用拇指持續用力按壓上蓋,直到壓緊在緩沖液槽上。
7. 電源條件:
1) 將電源插頭認準正負極插入電泳儀電源插孔內;
2) 給迷你垂直電泳槽通電開始電泳。恒壓200 V是SDS-PAGE和多數native PAGE電泳的推薦條件,可以被用于2塊膠和4 塊膠上,不同應用其優化的電壓條件會不同。在200 V電壓條件下運行SDS-PAGE 大約需要35 min。
8. 凝膠取出:
1) 電泳完成后關斷電源、拔出電源插頭;
2) 移開上蓋,小心取出電泳芯,倒出電泳緩沖液。為防止緩沖液漏灑,請在打開夾子前倒掉緩沖液;
3) 打開夾子,取出凝膠板;
4) 輕輕分離兩塊玻璃板,從凝膠板中取出凝膠;
5) 采用膠面向下,將膠與玻璃板浸泡在轉移緩沖液中,使凝膠與玻璃板分離;
6) 用蒸餾去離子水清洗PET 2迷你垂直電泳槽的電泳芯、緩沖液槽等。
質量保證
翌圣 PET 2 迷你垂直電泳槽為用戶提供為期2年的質量保證。凡由產品的原料及制作工藝造成的產品缺陷,在產品的質量保證期內均負責免費維修或更換。
如有下列情況發生,則產品不在質量保證范圍之內:
1. 由不正確的操作引起的損壞;
2. 由非我公司人員的維修改造引起的損壞;
3. 一般性易損部件,如:鉑金絲、玻璃板、橡膠墊等;
4. 使用有機溶劑造成的損壞。
附表1蛋白膠每孔最大上樣量
孔數 | 每孔寬度 | 0.75 mm | 1.0 mm | 1.5 mm |
5 | 12.7 mm | 70 μL | 105 μL | 160 μL |
9 | 5.08 mm | 33 μL | 44 μL | 66 μL |
10 | 5.08 mm | 33 μL | 44 μL | 66 μL |
15 | 3.35 mm | 20 μL | 26 μL | 40 μL |
HB220321