四重熒光染色試劑盒（四標五色）

原理:利用二抗標記的 HRP，催化 TYR 熒光探針反應結合至抗原蛋白周圍分子上，性共價標記蛋 白上，運用 HRP 二抗及一抗在微波熱修復條件下脫離掉抗原失活的原理，重復此過程，即可實現同 種屬熒光雙標及熒光三標以及多標（備注：此過程僅適合石蠟切片的熒光多標）。此試劑盒中的熒光 探針可單獨或配合使用。可以實現單標、雙標、三標或熒光放大等功能，極大豐富了此試劑盒的內 涵。

試劑盒組成：TYR-488 反應液(綠光)(1mL),-20℃；TYR-CY3 反應液（紅光）(1mL)，-20℃；TYR- 594;TYR-CY5 反應液(1mL)，-20℃ 高敏多聚 hrp 山羊抗兔二抗（4mL） 4℃。 備注：TYR-488 反應液/TYR -CY3 反應液/TYR-594/TYR-CY5 反應液在-20 度 下 ，均為固體，使用之前需解凍。 

操作流程： 1 對于石蠟切片，脫蠟至水。 

2 合適的抗原修復液修復(修復類型必須為抗原熱修復），3%H2O2 封閉，2%BSA-PBS 封閉，孵育一 抗，孵育 HRP 二抗。加入 50-200ul/ TYR-488/TYR -CY3/TYR-594/TYR-CY5 反應液反應 室溫 反應 10~15min. 3 重復步驟 2

4 四標完成后，染 dapi 細胞核。 

5 防熒光淬滅封片劑封片。

6 選擇合適激發吸收波長通道熒光拍照。