產地類別 | 進口 | 價格區間 | 1-3.5萬 |
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儀器種類 | 其它PCR儀 | 應用領域 | 醫療衛生,環保,食品,生物產業,農業 |
美國伯樂T100 PCR維修電話
BIO-RAD 公司具有20多年專業的PCR儀生產經驗,業界半導體PCR儀的潮流,滿足廣大客戶的不同需求。T100 PCR儀傳承伯樂性能穩定、技術創新的理念,是科研人員的明智之選。流線型簡潔設計的T100包括諸多優點,如智能化觸屏操作,具有8道編程梯度溫度以及快速、穩定的控溫性能,讓您的PCR實驗如此簡單。
節省編程時間:直觀的觸屏操作,使編程更為便捷
快速優化實驗流程:溫度梯度功能確保在一次實驗中優化PCR條件,快速獲得**結果
節省實驗室空間:機身小巧緊湊,更堅固,便于安防
**的文件管理模式:個性化文件夾及USB閃存,易于保存和備份程序
數據的高度一致性:性能穩定,升降溫速快,重復性高,結果可靠
美國伯樂T100 PCR維修電話
* 主屏幕:超大5.7” 彩色 VGA觸摸屏
* 用戶界面:直觀的圖形顯示,易于編程
* 數據端口:USB
* 樣品體積:1-100ul
* 樣品容量:96x0.2ml
* 升降溫速率:**4℃/秒,平均3℃/秒
* 溫度范圍:4-100℃
* 溫度均一性:±0.5℃
* 溫度**性:±0.5℃
* 梯度溫差范圍:1-25℃
* 梯度溫控范圍:30-100℃
* 存儲程序:500個,通過USB擴展可無限
故障一 :假陽性
出現的PCR擴增條帶與目的靶序列條帶一致,有時其條帶更整齊,亮度更高。
引物設計不合適:選擇的擴增序列與非目的擴增序列有同源性,因而在進行PCR擴增 時,擴增出的PCR產物為非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出現假陽 性。需重新設計引物。
靶序列或擴增產物的交叉污染:這種污染有兩種原因:一是整個基因組或大片段的交 叉污染,導致假陽性。這種假陽性可用以下方法解決:操作時應小心輕柔,防止 將靶序列吸入加樣*內或濺出離心管外。除酶及不能耐高溫的物質外,所有試劑或 器材均應高壓消毒。所用離心管及樣進*頭等均應一次性使用。必要時,在加標本 前,反應管和試劑用紫外線照射,以破壞存在的核酸。二是空氣中的小片段核酸污 染,這些小片段比靶序列短,但有一定的同源性。可互相拼接,與引物互補后,可擴 增出PCR產物,而導致假陽性的產生,可用巢式PCR方法來減輕或消除。
故障二 : 出現非特異性擴增帶
PCR擴增后出現的條帶與預計的大小不一致,或大或小,或者同時出現特異性擴增帶 與非特異性擴增帶。非特異性條帶的出現,其原因:一是引物與靶序列不*互補、 或引物聚合形成二聚體。二是Mg2+離子濃度過高、退火溫度過低,及PCR循環次數 過多有關。其次是酶的質和量,往往一些來源的酶易出現非特異條帶而另一來源的酶 則不出現,酶量過多有時也會出現非特異性擴增。其對策有:必要時重新設計引 物。減低酶量或調換另一來源的酶。降低引物量,適當增加模板量,減少循環次 數。適當提高退火溫度或采用二溫度點法(93變性,65左右退火與延伸)。
故障三: 出現片狀拖帶或涂抹帶
PCR擴增有時出現涂抹帶或片狀帶或地毯樣帶。其原因往往由于酶量過多或酶的質量 差,dNTP濃度過高,Mg2+濃度過高,退火溫度過低,循環次數過多引起。其對策有:減少酶量,或調換另一來源的酶。減少dNTP的濃度。適當降低Mg2+濃 度。增加模板量,減少循環次數。
故障四:母鏈結合
當PCR反應加熱至90-95左右時,會使模板DNA產生變形,解開為單鏈,當退火冷卻至55-60左右時,因為引物分子量較小,運動速度較快,和母鏈碰撞的機會很多,所以退火時引物優先會與母鏈相互結合。引物如果太大,會導致退火時無法激發模板,即引物無法優先與模板鏈相互結合,而是與較多的互補模板鏈相互結合。所以引物不能太大,一般不可以超過30個脫氧核苷酸的長度。
故障五:緩沖液
PCR緩沖液不僅對 pH 的變化 有緩 沖作用 ,而 且有利 于模板 退火 和引物 的 K離子 ,以及含有能夠激活 DNA 聚合酶的 MgZ+離子 ,還有 DNA聚合酶 的穩定劑 等。所以緩 沖液 中通 常會 含 有MgClz、Tris·HC1(pH 8.4,室溫 )、KCI、明 膠 等。Mg 離子對 Taq酶的活性以及專一性都具有一定 的影 響,Mg2+離子濃度過高 時,Taq酶專一性降低 而活性會加強 ,所 以當 Mg2+離子 的濃度過高 ,會導致非 特異性擴增產物積累,而當 Mg 離子 的濃度過 低 ,會 導至擴增 量降低 。MgCIz** 濃度一 般為1.5mmol/mL左右 。