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StarCHO Medium 全新CHO細胞化學成分確定培養基奧浦邁現貨

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上海惠誠生物科技有限公司,成立于2010年,企業宗旨“惠質產品,摯誠服務”。惠誠生物自成立以來,一直致力于為客戶提供一站式科學服務,產品覆蓋設計開發全過程,提供實驗室設計、實驗室建設、儀器設備、耗材、試劑、技術服務等專項配套服務。上海惠誠生物按照客戶的研發、生產和質量控制環節整合各種優質資源,優化資源組合,為客戶提供整體解決方案。

上海惠誠生物在上海建立研發中心,在湖北和江蘇有生產基地,在廣州和深圳建立子公司,立足上海,銷售網絡遍布全國,為客戶提供綜合服務。

“不忘初心,砥礪前行”。 上海惠誠生物經過多年不懈努力,目前產品線包括:生命科學,分析化學,生化試劑和儀器耗材。客戶遍布:生物醫藥,體外診斷,食品行業,石油化工,科研院校和研究所等領域。


特色產品:

生命科學:Crispr系列產品,組織因子,電泳預制膠,熒光染料,核酸探針,大包裝新冠抗原抗體,工業用酶

分析化學:糖化學研究,脂類分析,植物分析,聚合物分析,醫藥分析,試劑盒

生化試劑:PEG衍生物,多肽,大包裝膠體金輔料,大包裝生物醫藥輔料,通用生化試劑

儀器耗材:生物上游工藝,生物下游工藝,細胞治療,微生物監測,理化分析,公用系統。


品牌服務:

生命科學:

Abcam、AdooQ、ALPCO、Biolegend、Cytiva、Cayman、Dojindo、Immunostar、Invitrogen、Jackson、美天旎Miltenyi、Novoprotein近岸、Prozyme、R&D、SinoBiological義翹、Stratagene、SYSY、Thermo Fisher、Wako、Topoen

分析化學:

AOCS、Carotenature、CIL、DR、Elicityl、EP、Glycarbo、Larodan、Matreya、Megazyme、Nu-Chek、Olchemim、Phytolab、QCC、Reagecon、TLC、TRC、USP

生化試劑:

Aladdin阿拉丁、Avanti、Broadpharm、Focus、Laysan、LKT、Macklin麥克林、Sigma、TCI、Thermo Fisher、vivitide

儀器耗材:

湘儀、精騏、Corning、Eppordorf、浙江孚夏、力康、海爾、匯松、赫西、Mettler Toledo、Millipore、NEST、松下、Pall、Rainin瑞寧、Whatman、上海一恒



主要代理品牌以及產品




糖類標準品,脂肪酸標準品,花青素標準品,類胡蘿卜素,人乳寡糖等食品分析標準品

供貨周期 現貨 規格 1L
貨號 P225082

StarCHO Medium全新CHO細胞化學成分確定培養基奧浦邁現貨

StarCHO 是專為 CHO 細胞設計開發的全新化學成分確定基礎培養基,不含水解物、蛋白及任何動物來源,適用于常見中國倉鼠卵巢(CHO)細胞(CHOZN、CHO-K1、CHO DG44 、CHO-S 等)的高密度懸浮培養,可實現重組蛋白的高水平表達。StarCHO 基礎培養基與全新高性能補料 StarCHO Feed 及超濃縮補料CDFS36聯用,可實現更高水平的蛋白表達和質量。

應用范圍 

StarCHO 可應用于 CHO 細胞復蘇、傳代以及高密度流加培養。該基礎培養基適用于科研和基于細胞培養的大規模生物制品的生產,但不可直接用于人體或作為藥物使用。 

儲存:2~8℃冷藏,干燥避光保存 

運輸:常溫(液體)、冷藏(干粉)


液體培養基配制方法 

1. 取潔凈的配制容器,建議一次性配制體積不低于 1L; 

2. 加入最終配制體積 90%的超純水或注射用水,水溫控制在 25~35?C; 

3. 稱量 20.45 g/L 干粉培養基,緩慢加入水中攪拌 10 分鐘; 

4. 稱量 2.22 g/L 碳酸(空格)氫鈉,加入水中攪拌;

5. 緩慢加入 5N NaOH 調節 pH 到 8.3-8.5,攪拌 30 分鐘,此時應完(空格)全溶解; 

6. 緩慢加入 5N HCl 將 pH 調回至 7.0; 

7. 定容到最終配液體積,繼續攪拌 5 分鐘,測 pH,用 5N NaOH 或 5N HCl 將 pH 調回至7.0;

8. 取樣測滲透壓,加入 NaCl 調節滲透壓至 290±15 mOsm/kg(滲透壓計算公式:NaCl 添加量(g)=配液體積(L)*(290-檢測值)/31.5);

9. 繼續攪拌 10 分鐘,無菌過濾到合適容器,2~8℃避光保存。


StarCHO Medium全新CHO細胞化學成分確定培養基奧浦邁現貨

培養條件 

溫度 37℃,濕度 80%,5~8%CO2 

搖床設置:轉速 110-150rpm(振幅 50mm)


細胞復蘇 

1. 在 37℃水浴中快速(<2min)融化冷凍的細胞; 

2. 將冷凍管中的細胞液全部轉移到 125ml 含有 30ml 預溫過的 StarCHO 培養基的搖瓶中;

3. 放入 37℃,5~8% CO2,轉速 110~130rpm(振幅 50mm),濕度 80%的搖床中培養;

4. 細胞至少傳代 2 次,待其完(空格)全復蘇,細胞倍增時間(Population Doubling Time,PDT)穩定后,可按計劃進行后續操作。


細胞傳代 

1. 將 StarCHO 培養基放入 37℃條件下預熱 20-30min;

2. 取細胞密度≥1×10 6cells/ml、活率≥90%、處于對數生長期中期的細胞進行傳代;

3. 按接種密度為 0.5×10 6 ~ 1.0×10 6cells/L 的最終傳代體積,計算所需種子液量;

4. 無菌轉移所需量的種子液,添加至含所需體積的已預熱的 StarCHO 培養基的搖瓶中;

5. 將搖瓶放入溫度 37℃,濕度 80%,轉速 110~150rpm(振幅 50mm),5%~8%CO2的細胞培養搖床中進行培養; 

6. 每 2~3 天用新鮮的培養基按上述步驟進行傳代培養。


細胞馴化 

直接接種法 

1. 對于可以直接接種的細胞,可以從無血清培養基中直接接種到 StarCHO 培養基中,接種密度參考傳代步驟,并需要依據具體情況而定;

2. 繼續傳代細胞,直到細胞穩定生長; 

3. 傳代幾次后,細胞密度在接種的 3~4 天內達到 2×10 6cells/ml 及以上、細胞活率>90%,且倍增時間穩定,此時可以認為細胞已被馴化成功。

梯度馴化法

1. 對于傳統的生長在 5~10%血清或無血清的細胞,采用梯度馴化法,接種密度 3×10 5~4×10 5cells/ml;

2. 監測細胞生長情況,直到細胞密度達到≥2×10 6cells/ml; 

3. 用 StarCHO 培養基:原始培養基=25:75 的比例稀釋細胞。直到這個比例的培養基細胞生長良好,再進一步稀釋培養。

4. 在完(空格)全使用 StarCHO 培養基接種 3~4 天之后,活細胞計數應該至少達到 2×10 6cells/ml,細胞活性≥85%。此時,細胞已經馴化到 StarCHO 培養基中。


細胞凍存 

1. 準備處于指數生長的中期,細胞活率>90%,狀態較好的細胞。 

2. 測定活細胞密度,計算所需的凍存培養基體積,最終細胞密度>1×10 7cells/ml。

3. 準備所需的凍存培養基 90% StarCHO 培養基+10% DMSO,4℃冷藏保存。 

4. 400×g 離心 5 分鐘,用凍存培養基重新懸浮細胞。 

5. 根據項目具體需要,將懸浮液進行等分保存于適宜規格的冷凍管中。 

6. 按照標準程序,對冷凍管進行自動或手工操作降溫(每分鐘降 1℃)。 

7. 將細胞轉移到液氮罐中保存。



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