SNU-449(SNU449) 人肝癌細胞

細胞產(chǎn)品介紹

產(chǎn)品編號       hce-0320

細胞名稱       SNU-449(SNU449) 人肝癌細胞

生長特性       貼壁生長

形態(tài)特性       上皮樣

產(chǎn)品規(guī)格       1×10^6 cells/瓶

培養(yǎng)條件       RPMI-1640+10%FBS+1%P/S

生長條件       氣相：5%CO2  95% 空氣   溫度：37 ℃

凍存條件       90%FBS+10%DMSO

背景資料     

備注     

SNU-449(SNU449) 人肝癌細胞 細胞產(chǎn)品由ThermoFly星肽生物工程有限公司提供。公司主營產(chǎn)品：細胞系，中科院細胞庫，原代細胞，ATCC細胞系，抗體。

SNU-449(SNU449) 人肝癌細胞 細胞產(chǎn)品

SNU-449(SNU449) 人肝癌細胞 【細胞培養(yǎng)】

細胞培養(yǎng)是當前細胞生物學乃至整個生命科學研究與生物工程中基本的實驗技術。動物細胞培養(yǎng)為疫苗生產(chǎn)、研制與腫瘤防治等醫(yī)學實踐提供了全新的手段。細胞培養(yǎng)包括原核生物細胞，入細菌;真核單細胞生物，入酵母菌、四膜蟲等;植物細胞與動物細胞的培養(yǎng)以及于此密切相關的病毒的培養(yǎng)。

體外培養(yǎng)的細胞可分為原代細胞(primary culture cell)與傳代細胞(subculture cell)。原代細胞是指機體取出后立即培養(yǎng)的細胞。有人把培養(yǎng)的第1代細胞與傳10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)，適應在體外培養(yǎng)下條件下持續(xù)傳代培養(yǎng)的細胞稱為傳代細胞。

分散的細胞懸液在培養(yǎng)瓶中很快(在幾十分鐘至數(shù)小時內(nèi))就貼附在瓶壁上，這就稱為細胞貼壁。

分散呈圓球形的細胞一經(jīng)貼壁就迅速鋪展并開始有絲分裂，逐漸形成致密的細胞單層，稱為單層細胞(sigle layer cell),這種培養(yǎng)方法稱為單層細胞培養(yǎng)。

對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

如果漂浮的死細胞多，說明細胞有很多老化的，建議每次傳代的時候，在用胰酶消化之前，用PBS將細胞漂洗一遍，胰酶消化的時間要把握好，37℃2-3min即可，及時終止反應，否則胰酶消化過度對細胞損傷較大，也會有很多死細胞出現(xiàn)的;吹打細胞的動作要輕柔。

體外培養(yǎng)的細胞，不論是元代細胞還是傳代細胞一般不包吃體內(nèi)原有的細胞形態(tài)。但大體可以分為兩種基本形態(tài)：成纖維樣細胞(fibroblast like cell)與上皮樣細胞(epitbelial like cell)。此外還有一些可移動的游走細胞。

某些傳代細胞還可用懸浮方法培養(yǎng)。

對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

此培養(yǎng)條件比較復雜，懸浮培養(yǎng)的優(yōu)點是能同時獲得大量細胞。

SNU-449(SNU449) 人肝癌細胞 【細胞凍存】

待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行SNU-449(SNU449) 人肝癌細胞|細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液(防止細胞吸走)，加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。

SNU-449(SNU449) 人肝癌細胞 【復蘇的原則】

快速融化：必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使SNU-449(SNU449) 人肝癌細胞|細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶，對細胞造成損害。

SNU-449(SNU449) 人肝癌細胞 【注意事項】

然泰生物實驗室專業(yè)人士提醒廣大科研實驗者，購買SNU-449(SNU449) 人肝癌細胞培養(yǎng)，注意事項：

1. 收到細胞后，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯(lián)系。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內(nèi)操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

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