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豬胚胎睪丸傳代細胞;ST培養

具體成交價以合同協議為準
  • 公司名稱 上海研生實業有限公司
  • 品牌 ATCC
  • 型號
  • 產地 進口/國產
  • 廠商性質 經銷商
  • 更新時間 2018/5/8 14:31:10
  • 訪問次數 386

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上海研生實業有限公司成立于2011年專業銷售各種科學實驗產品,包括分子生物學、細胞生物學、免疫學、等多個研究及應用領域。旗下有“上研生”品牌。


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細胞名稱  豬胚胎睪丸傳代細胞;ST培養
形態特性 上皮細胞樣

品牌 貼壁生長

特征特性 ST細胞系建系于1960年(Mcclurkin,A W,et al)。ST細胞一般用于病毒增殖和分離,是豬細小病毒的理想宿主,可用于這類病毒的分離及增殖。

培養條件 MEM-EBSS:

Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS  

傳代方法 1:

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C125

凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS 

支原體檢測
豬胚胎睪丸傳代細胞;ST培養貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-CYP11A1/P450SCC/FITC 熒光素標記細胞色素P450 11A1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Anti-LIX1/FITC 熒光素標記LIX1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh CASKIN2 皮膚相互作用蛋白2抗體 規格 0.2ml

ED-1 (Ectodermal Dysplasia 1) 外胚層發育不良抗原 0.5mg

HBQ1 英文名稱: 血紅蛋白theta亞型1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh SIGLEC14 唾液酸結合性免疫球蛋白樣凝集素14抗體 規格 0.2ml

Anti-LIX1/FITC 熒光素標記LIX1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
KLK 11(Human Kallikrein 11) ELISA Kit 人激肽釋放酶11Multi-class antibodies規格: 48T

Anti-HCV-NS4a 丙型肝炎病毒-NS4a抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml

Rhesus antibody Rh MIF 巨噬細胞移動抑制因子抗體 規格 0.1ml

LZM(Human Lysozyme) ELISA Kit 人溶菌酶 96T

RIC8A 英文名稱: 膽堿酯酶抑制劑8抗體 0.2ml

CFHL5 英文名稱: 補體因子H相關蛋白5抗體 0.1ml

Anti-HCV-NS4a 丙型肝炎病毒-NS4a抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rabbit Anti-MK IgM/PE PE標記的兔抗猴IgM 0.1ml

GABPB2 英文名稱: 核呼吸因子2抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh ANKRD12 錨蛋白重復結構域蛋白12抗體 規格 0.2ml

Anti-Phospho-IRAK1 (Thr209) /FITC 熒光素標記磷酸化白介素-1受體相關激酶1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗人IgG F(ab')2 規格 0.1ml

Anti-Phospho-SATB1 (Ser47)/FITC 熒光素標記磷酸化核基質結合區結合蛋白1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Anti-Cyclin D2/FITC 熒光素標記周期素D2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Anti-LIF /FITC 熒光素標記兔抗白血病抑制因子抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Caspase-12 半胱胺酸蛋白酶蛋白-12抗體 規格 0.1ml

E.coli O6 (Escherichia coli O6) E.coli O6大腸桿菌菌體蛋白 0.5mg

HDPTP 英文名稱: His 結構域內含酪酸磷酸酶蛋白抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh SIRT1/sirtuin 1 沉默調節蛋白1抗體 規格 0.1ml

Anti-LIF /FITC 熒光素標記兔抗白血病抑制因子抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。



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