細(xì)胞名稱(chēng)   大鼠腹水癌細(xì)胞；Walker/LLC-WRC256品牌
形態(tài)特性 淋巴母細(xì)胞樣

品牌 懸浮生長(zhǎng)

特征特性 Walker 256是一株大鼠腹水癌細(xì)胞系。該細(xì)胞注入大鼠腹腔能快速形成腹水瘤，是研究抗腫瘤藥物體內(nèi)模型的*材料。

培養(yǎng)條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS　

傳代方法 1：

3傳代,2-3天傳一代  

傳代情況 C180

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS　

支原體檢測(cè) 陰性　

STR STR鑒定

同工酶

染色體

使用權(quán)限 A類(lèi)

庫(kù)存狀態(tài)：現(xiàn)貨
細(xì)胞規(guī)格：株
質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)支原體、無(wú)污染、符合標(biāo)準(zhǔn)
運(yùn)輸方式：新鮮運(yùn)輸和凍存管運(yùn)輸
貨期：新鮮運(yùn)輸需要1-2周，凍存管運(yùn)輸?shù)男枰?-3天
本公司的采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10^5cells/瓶；細(xì)胞經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
Anti-MYL3/Myosin light chain 3 /FITC 熒光素標(biāo)記肌球蛋白輕鏈3抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Anti-TrK A.B.C/TrK /FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸激酶A.B.C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh ABCB5 ATP結(jié)合蛋白家族5抗體 規(guī)格 0.1ml

Mouse Anti-Guinea pig IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標(biāo)記的小鼠抗豚鼠IgG 0.1ml

GRM1 英文名稱(chēng)： 促代謝型谷酸受體1抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh RAB21 G蛋白家族RAB21蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-TrK A.B.C/TrK /FITC 熒光素標(biāo)記酪氨酸激酶A.B.C抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
LTB4 ELISA Kit 大鼠白三烯B4Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-CHRNA2/FITC 熒光素標(biāo)記煙堿型乙酰膽堿受體A2(神經(jīng)型)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh FGL2 凝血酶原酶(纖維介素)抗體 規(guī)格 0.2ml

NGF(Human Nerve growth factor) ELISA kit 人的神經(jīng)生長(zhǎng)因子 96T

Mucin 4 英文名稱(chēng)： 粘蛋白4抗體 0.1ml

Annexin A8 英文名稱(chēng)： 膜粘連蛋白8抗體 0.1ml

Anti-CHRNA2/FITC 熒光素標(biāo)記煙堿型乙酰膽堿受體A2(神經(jīng)型)抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
Rabbit Anti-pig IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗豬IgG 0.1ml

GST tag 英文名稱(chēng)： GST標(biāo)簽蛋白抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh APOL3 載脂蛋白L3抗體 規(guī)格 0.2ml

Anti-phospho-IKK beta (Tyr199) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化核因子κB激酶beta抑制劑抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit anti-MG IgG/Cy7 Cy7標(biāo)記的兔抗長(zhǎng)爪沙鼠IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-Profilin 2/FITC 熒光素標(biāo)記前纖維蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格： 0.2ml
AO(Human Acrine Orange) ELISA Kit 人吖啶橙Multi-class antibodies規(guī)格： 48T

Anti-Phospho-PERK (Thr980) 磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml

Rhesus antibody Rh Histone H3 (Tri Methyl K4) *基化組蛋白H3抗體 規(guī)格 0.1ml

cmDNA(Human anti-cell membrane DNA antibody) ELISA Kit 人抗細(xì)胞膜DNA抗體 96T

Prion protein PrP 英文名稱(chēng)： 朊病毒/感染性蛋白抗體 0.2ml

Chloramphenicol 英文名稱(chēng)： 氯霉素抗體 0.2ml

Anti-Phospho-PERK (Thr980) 磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體Multi-class antibodies規(guī)格： 0.1ml
復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿(mǎn)37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過(guò)2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。