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DNA甲基化實(shí)驗(yàn)服務(wù)

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上海研謹(jǐn)生物科技有限公司提供RT-PCR技術(shù)服務(wù)、細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)服務(wù)、原位雜交技術(shù)服務(wù)、免疫沉淀技術(shù)服務(wù)、Western Blotting技術(shù)服務(wù)、PCR實(shí)驗(yàn)服務(wù),并為廣大科研用戶提供各種高品質(zhì)的化學(xué)試劑、生物學(xué)試劑、免疫學(xué)檢測(cè),ELISA試劑盒、生化試劑盒、分析標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、食品安全檢測(cè)試劑、動(dòng)物疫病類檢測(cè)產(chǎn)品、獸藥殘留檢測(cè)試劑、細(xì)胞培養(yǎng)服務(wù)等,應(yīng)用覆蓋藥物分析領(lǐng)域、食品安全領(lǐng)域、聚合物研究領(lǐng)域、環(huán)境監(jiān)測(cè)領(lǐng)域,客戶廣泛分布于食品、制藥、第三方檢測(cè)、環(huán)境測(cè)試機(jī)構(gòu)、化工、科研院校、生物工程等行業(yè)。

主營(yíng):

1生化試劑、標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照品、標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)、

2.ELISA試劑盒、分離液、分離液試劑盒

3.細(xì)胞:*細(xì)胞、國(guó)產(chǎn)腫瘤細(xì)胞、國(guó)產(chǎn)正常細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞

4.食品安全檢測(cè)試劑、動(dòng)物疫病類檢測(cè)產(chǎn)品、獸藥殘留檢測(cè)試劑

5.耗材:常用實(shí)驗(yàn)耗材、移液器


公司主營(yíng): 各種實(shí)驗(yàn)代做:WB代做,免疫組化,PCR代做,細(xì)胞檢測(cè),食品安全檢測(cè)試劑,獸藥殘留檢測(cè)試劑,動(dòng)物疫病類檢測(cè),銷售高品質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)品,對(duì)照品,ELISA試劑盒,細(xì)胞,血清,等等

產(chǎn)地類別 國(guó)產(chǎn) 應(yīng)用領(lǐng)域 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

DNA甲基化實(shí)驗(yàn)服務(wù)


甲基化檢測(cè)

DNA的甲基化(Methylation) 是早發(fā)現(xiàn)的基因表觀修飾之一,甲基化僅修飾胞嘧啶,DNA的甲基化修飾是在DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶的作用下使CpG雙核苷酸5端的胞嘧啶轉(zhuǎn)變?yōu)?-甲基胞嘧啶,由于CpG島主要位于基因的啟動(dòng)子和第--外顯子區(qū)域,其甲基化修飾通常抑制基因的表達(dá),去甲基化后基因重新活化和表達(dá)。DNA甲基化修飾方式在不改變基因序列的前提下實(shí)現(xiàn)對(duì)基因表達(dá)的調(diào)控。


主要檢測(cè)方式

1. MSP:甲基化特異性PCR (Methylation-specific PCR)即用亞硫酸氫鹽處理基因組DNA.未甲基化的胞嘧啶被轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,甲基化的胞嘧啶不會(huì)發(fā)生改變,設(shè)計(jì)針對(duì)甲基化序列的引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,然后通過(guò)電泳等檢測(cè)手段檢測(cè)MSP擴(kuò)增產(chǎn)物來(lái)確定位點(diǎn)是否存在甲基化。


2. BSP:亞硫酸氫鹽測(cè)序法(Bisulfite sequencing PCR)與MSP相似,用亞硫酸氫鹽將未甲基化胞嘧啶轉(zhuǎn)化為尿嘧啶,設(shè)計(jì)BSP引物進(jìn)行PCR,擴(kuò)增中尿嘧啶全部轉(zhuǎn)化為胸腺嘧啶,對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序來(lái)判斷CpG位點(diǎn)是否甲基化。


  • HRM:高分辨率溶解曲線法(High Resolution Melting)原理也是用亞硫酸氫鹽處理。未甲基化的胞嘧啶經(jīng)PCR擴(kuò)增變成胸腺嘧啶,樣品中的GC含量發(fā)生變化從而溶解溫度發(fā)生變化,從而確定位點(diǎn)是否發(fā)生甲基化。基于限制性內(nèi)切酶的


測(cè)序方法:

1.靶向富集甲基化位點(diǎn)的測(cè)序方法

2. SMRT測(cè)序法


結(jié)果展示

Assay Name: miR-152-S1(8CpG)

Sample ID: Si

Note:




實(shí)驗(yàn)完成周期及交付標(biāo)準(zhǔn)


1.實(shí)驗(yàn)周期: 3-5周

2.交付標(biāo)準(zhǔn):甲基化檢測(cè)結(jié)果、實(shí)驗(yàn)報(bào)告(實(shí)驗(yàn)步驟、試劑、儀器等)

需確認(rèn)的信息

1.目的基因及種屬

2.樣本類型(細(xì)胞、組織、血液等)

3.目的基因片段

參考文獻(xiàn)

[1] Sato S , Uemoto Y , Kikuchi T , et al. SNP- and haplotype-based genome-wide association studies for growth,

carcass, and meat quality traits in a Duroc multigenerational population[J]. Bmc Genetics, 2016, 17(1):60.

[2] Ichikawa K, Tomioka S , Suzuki Y , et al. Centromere evolution and CpG methylation during vertebrate speciation[J].

Nature Communications, 2017. 8(1):1833.

[3] Yang Y , Scott S A. DNA Methylation Profling Using Long-Read Single Molecule Real-Time Bisulfite Sequencing

(SMRT-BS)[J] Methods Mol Biol, 2017, 1654:125-134.

[4]Yang Y , Sebra R,Pullman B S , et al. Quantitative and multiplexed DNA methylation analysis using long-read

single-molecule real-time bisulfite sequencing (SMRT-BS).J]. Bmc Genomics, 2015, 16(1):350.


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