血竭又被稱為麒麟竭,具有活血定痛、化瘀止血、生肌斂瘡的功效,用于跌打損傷、心腹瘀痛、外傷出血、瘡瘍不斂等癥狀。2015年版《中國藥典》一部記載血竭為棕櫚科植物麒麟竭Daemonorops draco Bl.果實滲出的樹脂經加工制成。歷*,作為中藥所使用的血竭是外來品種。在市場上血竭主產于印度尼西亞和馬來西亞,又稱為“進口血竭”。
《中國藥典》2015版規定血竭的主要有效成分為血竭素(dracorhodin),且規定血竭中血竭素的含量不得低于1%。
作為血竭的功效成分,許多中成藥復方制劑常以血竭素作為定量指標,用于評價制劑工藝及穩定性的優劣,并制定制劑的質量標準。血竭素定量分析方法有薄層掃描法、高效液相色譜(HPLC)法和導數光譜法等,而在實際中高效液相色譜儀測定中藥材血竭中血竭素的含量以其簡便、可行、結果可靠得以普遍應用。
高效液相色譜儀測定中藥材血竭中血竭素的含量:
儀器設備:魯創LC-3000高效液相色譜儀,CXTH3000色譜工作站;Kromasil C18(4.6 mm×250mm,5 μm)HPLC色譜柱;柱溫箱;超聲波清洗器;真空泵;溶劑過濾器;十萬分之一天平。
溶劑:乙睛(色譜級),甲醇、磷酸、磷酸二氫鈉(分析純);血蝎素高氯酸鹽;血竭樣品。
色譜條件與系統分析:以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑;以乙腈一0.05mol/L磷酸二氫鈉溶液(50:50)為流動相;檢測波長為440nm;柱溫40℃。理論板數按血竭素峰計算應不低于4000。
對照品溶液的制備:取血竭素高氯酸鹽對照品9mg,精密稱定,置50ml棕色量瓶中,加3%磷酸甲醇溶液使溶解,并稀釋至刻度,搖勻,精密量取1ml,置5ml棕色量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻即得(每1ml中含血竭素26μg)(血竭素重量=血竭素高氯酸鹽重量/1.377)。
供試品溶液的制備:取本品適量,研細,取0.05~0.15g,精密稱定,置具塞試管中,精密加入3%磷酸甲醇溶液10ml,密塞。振搖3分鐘,濾過,精密量取續濾液1ml,置5ml棕色量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。
高效液相色譜儀測定法:分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10ul,注入液相色譜儀,測定,即得。
純血竭素性質極不穩定,中藥血竭存在對熱不穩定性,不同的溫度對其穩定性影響程度不同,溫度在70 ℃以下時對血竭素含量幾乎無影響,穩定性較好;而在70 ℃以上時則隨溫度升高血竭素含量下降明顯加快。故本制劑供試品溶液的制備采用超聲提取的方法。本方案優化了不同超聲處理時間對提取結果的影響,結果超聲處理10 min血竭素即可較好提取。
本魯創分析儀器有限公司制定的方法簡便、可行、結果可靠,可作為控制血竭產品質量的檢測方法。