產品英文名稱：MesenGro ® Human mesenchymal stem cells medium, 500ml
產品中文名稱：MesenGro ® 500mL 人間充質干細胞培養基

上海華雅思創的人間充質干細胞具有光明的臨床治療前景。然而，常用培養基含有胎牛血清（FBS），增加了病原體、異種抗原、批間不穩定性。美國FDA正考慮禁止使用 FBS于細胞治療。為此，StemRD成功研制了MessenGro®，一種無血清、無異種蛋白、化學成分明確的人間充質干細胞培養基。
MesenGro® 化學成分明確，設計用于人體骨髓、臍帶血和脂肪組織等間充質干細胞的zui大程度擴增。MesenGro® 化學成分明確是由于它的成分既沒有化學合成，也沒有重組體生產。
人間充質干細胞培養基直接來源于非人體動物細胞，無異種蛋白質。MesenGro® 如果用于一定組織細胞培養瓶中無需鋪板蛋白，可以節約鋪板材料和鋪板時間。

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：stemcell@ys-bio.com

MesenGro ® 500mL 人間充質干細胞無血清培養基 產品特性：
? 無血清 Serum-Free
? 無異種蛋白 Xeno-Free
? 化學成分明確 Chemically-Defined
? 無需昂貴的鋪板蛋白 No Plate Coating Necessary
? 生長分化優于血清培養基 Perform Better than FBS Medium

MesenGro® 500mL 人間充質干細胞無血清培養基 產品組成成分：
Part A: Mesen Gro基礎培養基 規格：1x450ml 保存溫度：2-8 ℃，避光 保質期：6個月
Part B: Mesen Gro補充培養基 規格：1x50ml 保存溫度：-80℃，避光   保質期：6個月

MesenGro® 500mL 人間充質干細胞無血清培養基 產品應用：

僅供研究使用。不適用于人或動物體外診斷與治療。

MesenGro® 500mL 人間充質干細胞無血清培養基  產品信息：

Human mesenchymal stem cells （hMSCs） hold promise for the treatment of a wide variety of diseases. Currently, fetal bovine serum （FBS） is added to the medium to achieve expansion of hMSCs. However, concerns have been raised over animal-born pathogens, immune reactions and lot-to-lot variations caused by the undefined nature of FBS. To address these issues, StemRD has developed MesenGro, a chemically-defined, serum-free and xeno-free medium for the expansion of hMSCs.
The MesenGro Chemically Defined MSC Medium （for simplicity, referred to as MesenGro in this document） has been designed for the maximum expansion of human mesenchymal stem cells （MSCs） derived from bone marrow, cord blood, or adipose tissue.MesenGro is chemically defined as its components are either chemically synthesized, recombinantly produced and purified. It can be considered xeno-free as none of its ingredients are directly derived from non-human animals. MesenGro further offers the convenience of no plate-coating if used with certain tissue culture vessels （see below）, saving cost of coating materials and time needed for coating.

MesenGro® 500mL 人間充質干細胞無血清培養基 相關操作：

人間充質干細胞復蘇

1.把人間充質干細胞培養基放入37°C水浴中預熱；
2.從液氮中取出間充質干細胞迅速放入37°C水浴快速解凍（解凍后不要繼續孵育細胞）；
3.在超凈臺中加入5ml的人間充質干細胞培養基重懸細胞，1000rpm離心5min；
4.棄上清,加入5ml的人間充質干細胞*培養基重懸細胞，轉移到T-25細胞培養瓶中（帶濾芯）；
5.將培養瓶置于37℃，5% CO2的無菌培養箱中培養；

6.第二天，用新鮮的人間充質干細胞*培養基給細胞換液。

人間充質干細胞傳代培養

1.在顯微鏡下觀察細胞（細胞生長在人間充質干細胞培養基中，且是次傳代），當細胞融合度超過80%時，即可傳代培養；

2.37℃水浴預熱培養基；

3.在超凈臺中，棄掉T-25細胞培養瓶中的培養基，加入2ml PBS清洗，再加入1ml 0.25%胰酶-EDTA消化細胞；

4.在顯微鏡下觀察到細胞變圓，有細胞開始脫離瓶壁時，即可加入5ml人間充質干細胞*培養基終止消化；

5.用移液器輕輕吹打瓶壁上剩余的細胞，并輕輕吹打將細胞吹散；

6.將細胞轉移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；

7.棄上清,加入15-20ml的人間充質干細胞*培養基重懸細胞后轉入T-75細胞培養瓶中或按適當比例接種到T-25細胞培養瓶中（確保細胞貼壁后融合度在25-50%之間），細胞密度在1x104 cells/cm2 (2.5x105 cells/T-25  瓶），混合細胞懸液，確保細胞均勻分布；

8.將培養瓶置于37°C，5% CO2的無菌培養箱中培養；

9.每兩天用新鮮、預熱的人間充質干細胞*培養基進行換液。

人間充質干細胞凍存

間充質干細胞凍存可用百恩維的“無DMSO無血清細胞凍存液”,具體操作如下。

1. 細胞消化和計數，用胰酶對待凍存的細胞進行消化，并對細胞進行計數；

2. 1000rpm離心5分鐘，去掉上清；

3. 根據細胞計數的情況，加入適量的凍存液，使細胞密度在1×106/ml左右（或根據自己希望達到的細胞密度）；

4. 輕輕地重懸細胞（務必重懸均勻），將重懸的細胞按等份加入到滅菌的凍存管（需提前做好標記或者貼上標簽）中，旋緊凍存管蓋；

5. 將凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒直接放入-80℃；

6. 第二天將細胞從-80℃轉移到液氮中。

MesenGro® 500mL 人間充質干細胞無血清培養基 注意事項：

1.在配制*培養基前，請把胎牛血清（FBS）、間充質干細胞生長添加劑（MSCGS）、青霉素-鏈霉素（P/S）放到2-8℃冰箱第二天解凍。

2.在使用*培養基前，需要把培養基放到37℃恒溫水浴中預熱，注意溫度不要超過37℃。

3.請把配制好的*培養基放在4℃冰箱避光保存，并盡量在一個月內使用完。若培養基要分幾次使用，請將胎牛血清（FBS）、人間充質干細胞生長添加劑（MSCGS）、青霉素-鏈霉素（P/S）解凍按用量分裝后保存。

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以下是*部分產品，更多請咨詢

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StemRD   MGro-500  MSC medium,chemically-defined,間充質干細胞培養基 500mL/瓶

LONZA   04-418Q    X-VIVO 15 無血清培養基 1L/瓶

Life Technology   087-0112DK    AIM-V? CTS? 無血清細胞培養基（細胞治療級） 1000mL/瓶

Pall   15950-017  Ultroser Serum Substitute 血清替代品 20mL/瓶

LONZA   12-725F   UltraCULTURE Serum-free Medium無血清培養基 500mL/瓶

BD 762165   PAXgene Blood RNA Tube RNA樣本收集管 100管/盒

LONZA 50150   SeaKem? Gold Agarose 金瓊脂糖粉 125g/瓶

LONZA CC-3162   EGM-2 BulletKit( CC-3156 & CC-4176 )套裝 Kit/套

Nunc 159910   175cm2易用培養瓶,PS,已滅菌,瓶蓋:過濾蓋 30個/箱

LONZA LT07-318  MycoAlert? Mycoplasma Detection Kit支原體檢測試劑盒 100Tests/盒

LONZA   LT07-418 MycoAlert? Mycoplasma Detection Kit支原體檢測試劑盒 50Tests/盒

Lonza   50-650U   Kinetic-QCL 192 Test Kit內毒素檢測試劑盒   192T/盒

Corning   431080    175cm⒉細胞培養瓶，Angled頸，透氣蓋 50個/箱

Corning   8388 125mL儲液瓶 Storage Bottles,PS,45mm瓶頸，帶蓋，滅菌，獨立包裝 24個/箱

Corning   430659    2ml凍存管, 聚丙烯，外旋蓋, 可自立圓底 500個/箱

Corning   3290     75cm2 CellBIND Surface培養瓶，已滅菌，透氣蓋 100個/箱

Corning   3292     175cm2 CellBIND Surface培養瓶，已滅菌，透氣蓋 50個/箱

BD-Falcon 352360   Cell Strainer, 100μm, Yellow 100um細胞濾網 50個/箱

BD Falcon 352070 50mL錐形離心管，高透明度聚丙烯,袋裝 500支/箱

BD Falcon 352096 15mL錐形離心管，高透明度聚丙烯,袋裝 500支/箱

BD BioCoat 354234   Matrigel Basement Membrane Matrix(標準型) 10mL/瓶

Cygnus   F550   CHO HCP ELISA Kit,3G宿主蛋白檢測試劑盒 96T/盒

Cygnus   F410   E.coli HCP ELISA Kit 大腸桿菌 96T/盒

Nalgene  5100-0001 Cryo 1℃ Freezing Container梯度降溫凍存盒 1個/箱

Nalgene    5026-0909   CryoBoxes 凍存盒 9X9 陣列，管瓶1.2/2.0mL   24個/箱

Nalgene   2250-0130 50L 可高溫高壓操作的細口大瓶（帶手柄）   1個/箱

Nalgene   2319-0050    20L 可高溫高壓滅菌的細口大瓶（帶放水口）    1個/箱

Hyclone  SH30084.03 FBS 優等澳洲胎牛血清 500mL/瓶

PeproTech   100-18B-500   Recombinant Human FGF-basic (154 a.a.)因子 500ug/支

Parafilm PM-996   Parafilm? M Laboratory Film 封口膜 12卷/箱