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【FACSCelesta實驗應用系列】之10色T細胞亞群的免疫分型

來源:北京眾仁鑫商貿有限公司   2021年11月05日 11:12  

實驗概述】

本實驗成功采用FACSCelesta的10色方案進行人外周血白細胞中T細胞亞群的的免疫分型,實現了一管即清楚區分Th/Ts/Treg/TEM/TCM/Na?veT/Mature T等十幾個T細胞亞群,對于T細胞亞群的成熟、分化及活化等的研究起到重要作用!

 

【實驗方法】

    ①/ 儀器配置

 

  Flow cytometer  Laser
  FACSCelesta  488nm Blue Laser
  640nm Red Laser
  405nm Red Laser

 

    ②/ 多色配色方案及流式試劑

 

    ● 配色方案

PEAPC-Cy7Alexa Fluor-700BV421BV510BV605PE-CF594PerCP-Cy5.5BB515BV786
CD127CD3CD45RACD25CD8CD4CCR7CD45CD28CD27

 

    ● 流式試劑

 

  Products NameCatalog No.CloneSize
  BD Pharmingen™ PE Mouse Anti-Human CD127557938HIL-7R-M210.1 mg
  BD Pharmingen™ APC-Cy™7 Mouse Anti-Human CD3557832SK7100T
  BD Pharmingen™ Alexa Fluor® 700 Mouse Anti-Human CD45RA560673HI10050T
  BD Horizon™ BV421 Mouse Anti-Human CD25562442M-A251100T
  BD Horizon™ BV510 Mouse Anti-Human CD8563919SK1100T
  BD Horizon™ BV605 Mouse Anti-Human CD4562658RPA-T4100T
  BD Horizon™ PE-CF594 Mouse Anti-Human CD197 (CCR7)56238115050350T
  BD Pharmingen™ PerCP-Cy™5.5 Mouse Anti-Human CD45564105HI30100T
 BD Horizon™ BB515 Mouse Anti-Human CD28564492CD28.2100T
 BD Horizon™ BV786 Mouse Anti-Human CD27563327L128100T
 BD Pharm Lyse™ Lysing Buffer (10x )555899
100ml

 

【實驗結果】

 

如圖所見,所有群體陰陽性區分明顯,群體集中,即使是弱表達群體Treg也區分非常清楚,實驗中使用了Diva軟件的自動補償功能,補償準確、操作極其簡單,為多色實驗提供方便、快捷且精確的補償操作。

* 本資料僅限科研用途使用


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