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腫瘤細胞具有*的增殖能力,在一個適宜的環境中就能夠實現細胞增殖分裂,裸鼠成瘤是常見的驗證腫瘤細胞體內增殖的模型。由于大部分腫瘤研究使用到的是人類來源的細胞,種植到免疫正常的動物體內會發生免疫排斥反應,所以需要用免疫缺陷小鼠作為成瘤模型的動物。
一、實驗動物
動物種屬、品系:BALB/C裸鼠
動物性別:雄性
動物年齡:4-6周齡
二、造模方法
雄性裸鼠,接種腫瘤細胞密度1*10^6~1*10^7cell/ml,接種0.1~0.2ml,皮下(腋下或背部皮下)注射成瘤。將培養的細胞收集起來調整到適宜濃度重懸于不含血清的培養液或PBS中,放于冰盒中攜至動物房,直接注射即可。制備周期:4-8周,根據腫瘤細胞種類調整。
三、注意事項
1 腫瘤細胞:何種腫瘤(用對數生長期的,活力高的);其次接種細胞的數量記數要準確。一般來說腫瘤細胞存活力還是比較高的,所以重點要考慮細胞數的問題,不要超過1*10^7;
2 接種方式:注意不要漏液,否則會損失細胞;
3 飼養環境:要求SPF條件;
4 時間方面:
1)接種時間,在1小時之內完成。但在實際操作過程中,裸鼠的數量可能較多,1小時之內做不完,故可以預先將細胞放在冰盒里暫為保存。 2)成瘤時間,每種腫瘤細胞情況不同,若細胞數合適,一般一周左右能成瘤;另外,如果是皮下注射,要注意是否打到深層組織,比如肌肉,那即使成瘤了,也不好觀察。
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