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人半乳糖6硫酸酯酶試劑盒
上海乾思生物公司人半乳糖6硫酸酯酶試劑盒細胞近3000種,來源于美國ATCC,細胞都是經過嚴格質量控制,在中國大陸努力搭建正牌細胞與國內廣大科研人員之間的溝通橋梁。為您提供外,還有更多相關實驗產品,標準品,細胞株和實驗技術服務等等前期后續服務。選擇正確的實驗試劑或材料是實驗成功的關鍵。
購買上海乾思生物細胞注意事項(乾思生物)發布
一、客戶收到細胞先不開蓋,放在培養箱靜置若干小時后(看細胞密度而定)在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況,并對細胞進行不同倍數拍照(建議受收細胞時的培養基拍一張照片,觀察培養基的顏色和是否有漏液情況,顯微鏡下拍細胞100X,200X各一張),排除細胞本身污染的情況;
收到細胞未開封,出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
二、如為貼壁細胞,請在顯微鏡下觀察細胞密度:
1. 未超過80%匯合度時,用75%酒精(建議配置75%酒精的水也是滅菌超純水,噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內,嚴格無菌操作;然后打開蓋子,先把培養基吸出10ml左右,放在離心管里,然后瓶口過火(嚴禁直接傾倒),這樣可以保證不污染,再用10ml的移液管,將剩余的培液全部吸出,放于離心管中,培養瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培養16hr(時間根據細胞生長情況調整)之后,傳代或者凍存。
2. 超過80%匯合度時,請按細胞培養條件傳代培養。具體步驟如下:
1) 棄去培養液,用3ml PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次;
2) 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于T25培養瓶中,倒轉放于37度培養箱1-3分鐘預熱,然后又將培養瓶倒轉大約30秒后,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓分散,輕敲幾下培養培養瓶,細胞隨即脫落下來;
3) 加入6-8ml*培養基,吸出,分到新的培養瓶中,按要求分瓶。
三、如為懸浮細胞,吸出培養液,1000轉/分鐘離心5分鐘,吸出上清,管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。
注意:換液時一半用我們的培養基,一半用你們的,以免細胞不適應而造成生長不好。
四、細胞出現問題,可重發的情況有哪些?判定標準是什么?
(1)細胞運輸途中遭遇的各種問題,細胞丟失、破損、漏液等,重發;
(2)凍存的細胞復蘇后,絕大多數細胞未存活,重發;
(3)存活的細胞靜置24小時后,絕大多數細胞未存活,重發;
(4)凍存的細胞復蘇后或存活的細胞靜置4小時后并且未開封,出現污染,重發;
(5)視具體情況而定。
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細胞培養技術3個原則:1、用自己的一套試劑,不要和別人混用;2、勤觀察細胞,像養寵物一樣喜愛和關心;3、有規律地換液和傳代,不要“三天打魚,兩天曬網”。
質量可靠,售后有保障
★我庫細胞近3000種,來源于美國ATCC,細胞都是經過嚴格質量控制。
凍存細胞時間為5-7個工作日,活細胞為7-15個工作日。
★由于細胞庫現有細胞類目多,為了不出現混亂錯誤,需要了解相關細胞價格及詳細資料請老師,對您造成的不便還請見諒!
培養的細胞生長至一定密度之后,由于培養液中營養逐漸消耗、代謝物逐步積累(可見到培養液變黃),而且細胞的生長空間也受到限制,就會影響到細胞的繼續生存。這時就需要分離出一部分細胞和更新培養液,這一過程就叫做傳代。
1、貼壁細胞的傳代
具體操作如下:
1.1、傳代前準備:
1.1.1、預熱培養用液:把裝有培養液、PBS和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴鍋內預熱。
1.1.2、用75%酒精擦拭雙手和經過紫外線照射的超凈工作臺
1.1.3、正確擺放使用的器械:保證足夠的操作空間,不僅便于操作而且可減少污染。
1.1.4、點燃酒精燈:注意火焰不能太小。
1.1.5、準備好將要使用的已滅菌的空培養瓶。
1.1.6、取出已經預熱好的培養用液,用酒精棉球擦拭好后方能放入超凈臺內。
1.1.7、從培養箱內取出細胞,注意取出細胞時要旋緊瓶蓋,用酒精棉球擦拭顯微鏡的臺面,再在鏡下觀察細胞,并做好記錄。
1.1.8、細胞培養瓶經用75%酒精擦拭后,再放入超凈臺。
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