毛細管液相色譜是一種快速的分離分析方法 毛細管液相色譜是一種快速的分離分析方法。它能大幅度提高分離效能,大大減少了樣品、流動相和固定相的消耗,檢測靈敏度優(yōu)于傳統(tǒng)的HPLC,對于較為難得的試樣極為有利;此外還容易與其它檢測器(如質(zhì)譜)在線聯(lián)用,因此為復雜樣品的分離分析提供了可能,十分適合于生物樣品的分析,在生化分析、手性分離、神經(jīng)科學、蛋白質(zhì)及多肽的研究以及醫(yī)藥、工業(yè)聚合物與添加劑的分析等領(lǐng)域都具有廣闊的應(yīng)用前景。 制備分離性能良好的毛細管液相色譜柱是μHPLC技術(shù)的核心。整體柱(monolithic column),又稱無塞柱(fritless column),是一種利用有機或無機聚合方法在色譜柱內(nèi)進行原位聚合的連續(xù)床固定相。它可以在毛細管中直接制備而成,由此可以省略常規(guī)色譜柱的填充過程,同時由于整體柱中含有許多大孔,形成孔穴網(wǎng)絡(luò),毛細管液相色譜具有很好的滲透性,有利于大幅度提高流動相流速,且不降低柱效,從而降低了對設(shè)備的要求。作為一種新型的色譜柱,它克服了顆粒填充柱的諸多缺點,具有*的發(fā)展前景。
以硅膠為基質(zhì)的液相色譜整體柱具有機械強度高、比表面大以及優(yōu)良的化學表面改性特征,使其在液相色譜中獨樹一幟。然而關(guān)于硅膠基質(zhì)整體柱的制備技術(shù),國外雖有報道,但其技術(shù)復雜、繁瑣、重現(xiàn)性差,而且制成的骨架結(jié)構(gòu)在干燥和老化步驟易龜裂,嚴重影響了柱效,從而限制了它的進一步發(fā)展。本研究采用了改進的制備技術(shù),成功制備出了直徑為50、75、100直至200 μm的一系列大口徑毛細管整體柱。本方法簡便易行,重現(xiàn)性好。毛細管液相色譜用多環(huán)芳烴系列化合物表征C18反相整體柱的色譜行為,取得了滿意的分離效果。
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