無霜式擬南芥培養箱可用于基因表達、器官發育、基因突變等研究。
1、首先把擬南芥種子放到濾紙上,用70%酒精進行消毒處理,再用*進行處理(也可選擇20%漂白劑以及0.05%TritonX-100非離子表面活性劑做殺菌處理20分鐘)。用無菌水沖洗5遍,然后將種子點到MS培養基上,pH5.9,另加0.9%瓊脂以及2%蔗糖。
2、把種子放到4℃黑暗條件下進行春化48h-72h左右,在長日照或短日照條件下催芽,。利用PLC控制器,編輯簡單的晝夜模式,設定光照時間16小時(黑暗8小時)或者光照14小時(黑暗10小時);選配Q23+連續光強調節裝置,設定光照強度為100-150umol/m2.s;設定室內溫度為光照條件下20-22℃,黑暗條件下18-20℃;選配濕度控制系統,設定室內相對濕度70%。
3、出苗大約7~10天,然后移入土中培養,采用底部灌溉方式澆水(利用土壤的毛細作用)。在*次澆水前,可使土壤*干燥,以后每隔7~10天澆一次水。
4、土壤可用營養土、蛭石以及珍珠巖比例10:1:1的比例配置,也可直接用堆肥、蛭石以及草炭等進行混合。在生長過程中,可用普通的花肥施肥一次或者不施肥。
5、當植株長到一定高度時,可剪斷莖桿,以產生更多的花序,可用于轉化研究或者獲得更多的種子。
無霜式擬南芥培養箱特殊培養:
為了加快擬南芥生長速度,在移入土壤培養后,可設定長日照,利用PLC控制器,編輯程序設定24h光照,光強100-250umol/m2.s,溫度持續22-23℃。
擬南芥根系處理培養,可減少光照時間為8-12h,提高光照強度為100-350umol/m2.s,溫度為光照條件下22-23℃,黑暗條件下18-20℃,其余培養條件同正常培養。
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