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產品介紹：
YobibioTrans R-100 RNA Transfection Reagent是一種特別的RNAi特異性陽離子脂質體轉染試劑，本品推薦用于將siRNA、microRNA(miRNA)、mimic、inhibitor 等小片斷RNA 轉染入動物細胞（包括各種細胞系、原代細胞、懸浮細胞、昆蟲細胞等）。本品可以常溫運輸，本品在多種細胞系的驗證中均表現了很好的RNA 轉染效率，并有很低的細胞毒性。
特點：

1，超高的轉染效率，且所需 RNAi 濃度低，基因抑制效果更好，非特異性效應極少
2，針對 miRNA 拮抗劑和模擬物具有出色的轉染效率 ·細胞毒性低、易于優化
3，可用于多種細胞類型
4，簡單、高通量的即用型轉染

規格包裝: （備注：以下為常用規格，更多規格可根據客戶需求定制）
   
儲存事項：冰袋或者濕冰運輸，短時間內可室溫運輸，但需避免光源熱源，長時間儲存于 4℃，切勿凍存，有效期 24 個月。
重要提示：
產品用于：僅供研究使用，不適用于人或動物的體外診斷與治療。
由于實驗受多種因素影響具有不確定性，本說明書操作說明僅供參考，最終解釋權歸本公司所有。
警告！產品對人體危害性未知，請遵循操作說明。穿戴適當的防護眼鏡、衣服和手套！如果不小心接觸，應立即用大量的水沖洗，如引起身體不適應前往醫院治療。
注意事項
•整個實驗過程避免細胞污染由于不同細胞耐受性不同，由于不同細胞耐受性不同，我們建議您在做批量實驗前，可根據實際質粒和細胞的轉染效率，分不同梯度量先做預實驗，摸索最佳 siRNA 和 YosiTrans R-100 的混合比例。優化后可根據自身細胞情況具體用量。
•采用本品進行轉染，RNA 用質量(ug)進行計量，對21nt 雙鏈的siRNA 來說，1OD=3.0nmol=40ug。
•siRNA 等較短RNA 請參照表1 中siRNA 用量，mRNA、shRNA 等較長RNA請參照表1 中mRNA 用量。
•如轉染后需要用Trizol 提取RNA，建議轉染后6 小時換液。
操作步驟 (不同的細胞已及轉不同面積的孔板操作起來略有不同，以 24 孔板 siRNA 轉染為例)
1.提前一天細胞種植 貼壁細胞：提前一天將細胞種植在24 孔板中，以轉染時細胞匯合度在30％左右為宜，轉染前全培養基總量為0.45ml。
懸浮細胞：采用對數生長期的細胞，數量為常規培養細胞數的1/3 進行轉染實驗。
2.轉染過程
⑴取0.67ug(50pmol)的siRNA，加入無血清稀釋液，充分混勻，制成RNA稀釋液，終體積為25μl。
注意：無血清稀釋液建議采用OPTI-MEM、無血清DMEM 或1640。
⑵取1ul 的R100，然后加入24ul 無血清稀釋液體，充分混勻，制成R100 稀釋液，終體積為25μl。室溫靜置5 分鐘。
⑶將R100 稀釋液和RNA 稀釋液充分混合（可用振蕩器振蕩或用加樣器吹吸10 次以上）混合，室溫靜置15 分鐘。轉染復合物制備完成。
⑷將50μl 轉染復合物滴加到有0.45ml 全培養基（可含10%血清和抗生素）的細胞上，混合均勻。
⑸轉染后6 小時觀察細胞狀態，如狀態良好可不必更換培養基，繼續培養24-96小時得到結果。
注意：
1.siRNA 轉染后，繼續培養24-72 小時在mRNA 水平得到結果，繼續培養24-96 小時在蛋白水平得到結果。mRNA 轉染后，根據需要在24 小時后得到結果。
2.由于血清和培養條件等差異，轉染后鏡下培養基中可能出現少量黑點狀沉淀，為轉染試劑和血清中蛋白結合產物，不影響轉染結果和細胞狀態，可通過換液除去。

4.優化 由于RNA 序列差異、合成條件不同以及是否帶有熒光等標記，決定了RNA 和轉染試劑在不同情況下會有不同的最佳條件，建議先進行預實驗優化。下表列出了在24well 的優化方案，供參考。
RNA 濃度和轉染試劑量的優化(24well)

根據優化實驗結果，固定RNA(μg):轉染試劑量(μl)的比值，按培養器皿表面積比例應用到其他培養容器。

本公司所有產品僅供科研使用