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什么是原代細胞
原代細胞(primary culture cell)是指從機體取出后立即培養(yǎng)的細胞。動物組織經(jīng)胰蛋白酶等消化、分散,獲得單個細胞,再生長于培養(yǎng)皿中。大多數(shù)組織可以制備原代細胞,但生長的快慢及難易程度不一。腎和睪丸常用,甲狀腺細胞生長較慢,只用于某些特定的病毒如豬傳染性腸胃炎病毒的培養(yǎng)。
組織塊培養(yǎng)法
1、組織塊接種后的前3天,在觀察和移動的過程中,注意不要引起液體的振蕩。為保證組織塊附著于瓶壁上,要避免頻繁晃動。
2、加入的培養(yǎng)液不宜過多,避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫落下來。
3、當細胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細胞,它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會影響原代細胞的生長。
4、為促進組織塊盡快粘貼在培養(yǎng)瓶皿上,可以在種植前先將膠原薄層涂在培養(yǎng)瓶底壁上。
采用酶或機械方法直接從人或動物組織中分離出來的細胞。嚴格來說,從機體分離出來到傳代之前的細胞稱為原代細胞,部分的原代細胞在體外可以分裂10-15次左右(這與細胞的端粒長短有關),再加上取材,成本,環(huán)境等因素,通常會把培養(yǎng)的第一代到第十代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞。
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