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硅膠色譜柱的使用方法
硅膠因其優良的機械強度和表面易改性等特征,已成為應用廣泛的色譜柱填料。硅膠柱具有柱效高、選擇性好及分析速度快等特點,因而被廣泛用于分離極性小分子如藥物,而用于糖、肽或蛋白質分離較少。
硅膠色譜柱是一種常用的分離柱,適用于化合物的分離和純化。下面介紹硅膠色譜柱的使用方法:
1.準備工作
將硅膠色譜柱安裝在色譜系統中,先用純溶劑進行預洗,以去除任何可能殘留在色譜柱中的雜質。
2.樣品制備
將樣品溶解在適當的溶劑中,使其濃度達到適當的濃度,以便在色譜柱中進行分離。同時,需要去除可能影響分離的雜質。
3.進樣
將樣品注入到色譜柱項端的進樣口中,注意不要將空氣泡進入色譜柱中。
4.洗脫
通過向色譜柱中注入一一 系列不同極性的溶劑,讓樣品在硅膠層中進行分離。通常情況下,極性較低的溶劑先行通過,隨著溶劑極性的逐漸增加,樣品分離出來的時間也會有所不同。
5.收集和檢測
在分離過程中,將分離出來的化合物收集起來,進行后續的檢測和分析。
6.清洗
在結束實驗后,需要使用純溶劑對硅膠色譜柱進行清洗,以便下次再次使用。