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HPLC分析中溶劑效應成因及解決方案
日常液相分析中,我們時常會聽到一個名詞叫溶劑效應。溶劑效應在方法開發、藥典方法重現時經常會遇見。當發生溶劑效應時,會發現色譜圖有峰前沿、峰變寬、峰分裂乃至出現不出峰等問題。
何為溶劑效應?
溶劑效應顧名思義,可以理解為溶劑產生的效應。此處的溶劑指的是溶解樣品的溶劑,也稱樣品溶劑,或稱Solvent等。溶劑效應意為上樣溶劑對色譜分離或化合物峰形產生的影響或作用。最為常見的情況為上樣溶劑比初始比例流動相洗脫能力強,此時就有可能產生溶劑效應,對化合物峰形產生不利影響。
進樣過程中溶劑效應的產生
在樣品進樣過程中,通常會經過幾個階段,樣品吸取、樣品輸送、樣品進入色譜柱等。在這幾個階段中,樣品進入色譜柱時會發生瞬間擴散,使得整體系統中,溶液體系不再均勻。此時便可能會產生溶劑效應。先行進入色譜柱的上樣溶劑+樣品分子會瞬間擴散至色譜柱平衡過程中的初始比例流動相。但是隨著樣品全部進入,此時后面進入色譜柱的樣品分子所處在溶劑變為了初始比例流動相+上樣溶劑。則會產生一個現象,部分樣品分子行進速度出現了“異常"。從化合物峰形上分析就會發現,本來對稱的高斯峰,出現了分裂、變寬、拖尾等情況。
溶劑效應的解決方案
① 修改上樣溶液
將上樣溶劑修改為初始比例流動相是最為理想的方法與解決方案,但是如果是藥典方法或標準方法對于此項修改或需要進行方法驗證,費時費力。
② 修改進樣體積
修改進樣體積通常會對溶劑效應有所改善,但是進樣體積減小方法靈敏度也會有所損失。
③ 采用溶劑效應消除器
鯤霆生物溶劑效應消除器可有效消除,因進樣溶劑與初始流動相洗脫能力差異導致的峰分裂,峰變寬,不出峰等問題。因使用藥典、國標等方法無法修改的情況時,溶劑效應消除器是您解決進樣峰形的理想之選。
鯤霆生物溶劑效應消除器產品試用開放申請中,可聯系我們申請試用。
產品特點
1、長使用壽命-Solvent-Smoother內無填料,通過特殊設計結構消除溶劑效應,以PEEK和不銹鋼為材料的耐腐蝕設計,使用壽命長;
2、改善峰形- Solvent-Smoother可消除因溶劑效應引起的峰形前延,顯著改善峰形對稱性,柱效成倍提高;
3、兼具過濾功能- Solvent-Smoother內有篩板,可同時兼具在線過濾器的功能,攔截固體顆粒物質堵塞色譜柱篩板,使用后可取下超聲清洗。
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