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一、牛包蟲病抗體ELISA檢測試劑盒
通用名:牛包蟲抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Bovine Hydatid Disease(ELISA)
二、包裝規格 96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒
三、預期用途 包蟲病( Hydatid, 英文縮寫HYD)又稱棘球蚴病,是人感染細粒棘球絳蟲及多房棘球絳蟲的幼蟲所致的慢性寄生蟲病。
牛包蟲抗體檢測試劑盒用于檢測牛血清中包蟲抗體,可用于包蟲疫苗免疫效果評價或該病的輔助診斷。
四、試劑盒原理
牛包蟲抗體檢測試劑盒由預包被包蟲抗原的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測牛血清、血漿樣本中包蟲抗體。實驗時在酶標板中加入對照血清和待檢樣本,經溫育后若樣品中含有包蟲抗體,則將與酶標板上抗原結合,經洗滌除去未結合的其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶標結合物反應形成藍色產物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產物變為黃色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有包蟲抗體。
五、牛包蟲病抗體ELISA檢測試劑盒組成
酶標記物、稀釋液、洗滌液、底物A/B液、終止液、陰/陽性對照、酶標板、蓋板膜、稀釋板
六、儲存及有效期
于2~8℃避光保存,有效期為12個月。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為12個月。
【樣品準備】
1.取動物全血按常規方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清先按10倍稀釋(如在稀釋板中加入90μl樣品稀釋液再加10μl血清,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水+1份濃縮洗滌液)。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入樣品稀釋液90μl,再加入稀釋后的血清10μl。
注:樣本稀釋比例相當于1:100。
4.混勻,蓋好蓋板膜,置37℃(推薦水浴)避光反應30分鐘。
5.扣去孔內液體,每孔加350μl工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,最后一次拍干。
6.每孔加酶標記物100μl,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。