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一、雞傳染性支氣管炎病毒抗體檢測試劑盒
通用名:雞傳染性支氣管炎病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)
英文名:Diagnostic Kit for chicken Antibodies to Infectious Bronchitis Virus (ELISA)
二、包裝規格 96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
三、預期用途 雞傳染性支氣管炎(Infectious Bronchitis,IB)是由傳染性支氣管炎病毒引起雞的一種急性、高度接觸傳染性呼吸道傳染病,本病呈世界性分布,是嚴重危害養禽業的最主要疫病之一。疫苗免疫是預防和控制雞傳染性支氣管炎發生的最有效途徑,而免疫后抗體水平的高低反映實際的疫苗免疫效果,直接關系到免疫雞群對禽流感病毒的抵抗力。
雞傳染性支氣管炎抗體檢測試劑盒適用于:雞血清抗體的檢測,以確定被檢雞是否感染過雞傳染性支氣管炎病毒或免疫雞體內抗體水平;評估雞群感染IBV的風險程度;了解雛雞母源抗體水平,為IBV免疫程序的制定提供參考。
四、試劑盒原理
雞傳染性支氣管炎病毒抗體檢測試劑盒系由預包被雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)重組N蛋白的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測雞血清或血漿中雞傳染性支氣管炎病毒特異性抗體。實驗時,在酶標板中加入對照血清和稀釋的待檢血清,經溫育后,若樣品中含有雞傳染性支氣管炎病毒的特異性抗體,則將與酶標板上抗原結合,經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶結合物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色產物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產物變為黃色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有特異性抗體。
五、檢測試劑盒組成
酶標板、酶標記物、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、底物液A、底物液B、陽性對照、陰性對照
六、儲存及有效期
于2~8℃避光保存,有效期為12個月。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為12個月。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入樣品稀釋液90μl,再加入稀釋后的血清10μl。
注:樣本稀釋比例相當于1:100。
4.混勻,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應30分鐘。
5.甩去孔內液體,每孔加350μl工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,最后一次拍干。
6.每孔加酶標記物100μl,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
【參考值】 實驗正常的情況下,陰性對照≤0.2,陽性對照≥0.6。
【檢驗結果的解釋】
1.C.O(臨界值)=2.1× 陰性對照孔均值(陰性對照孔均值低于0.1時以0.1計算)。
2.未曾免疫雞群:樣品A值≥C.O為陽性;樣品A值<C.O為陰性。
3.免疫雞群:監測并記錄樣本當時的抗體水平,根據結果分析抗體水平的分布及雞群免疫狀態的動向。