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一、雞新城疫抗體檢測試劑盒
通用名:雞新城疫病毒IgG抗體檢測試劑盒(酶聯免疫法)
英文名:Diagnostic Kit for chicken Antibodies to Newcastle Disease Virus (ELISA)
二、包裝規格 96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
三、預期用途 雞新城疫是由新城疫病毒(Newcastle Disease Virus,NDV)引起的一種高度接觸性傳染病,又稱亞洲雞瘟或偽雞瘟。主要特征是呼吸困難、便稀、神經紊亂、粘膜和漿膜出血。
雞新城疫抗體試劑盒適用于雞血清中新城疫病毒特異性抗體的檢測,可用于雞新城疫疫苗免疫效果評價。
四、試劑盒原理
雞新城疫抗體試劑盒系由預包被新城疫病毒(NDV)抗原的酶標板、酶標記物及其他配套試劑組成,應用酶聯免疫法(ELISA)原理檢測雞血清或血漿中新城疫病毒特異性抗體。實驗時,在酶標板中加入對照血清和稀釋的待檢血清,經溫育后,若樣品中含有新城疫病毒的特異性抗體,則將與酶標板上抗原結合,經洗滌除去未結合的抗體和其他成分后;再加入酶標記物,與酶標板上抗原抗體復合物發生特異性結合;再經洗滌除去未結合的酶標記物,在孔中加TMB底物液,與酶反應形成藍色產物,顯色深淺與樣品中的特異性抗體含量成正相關;加入終止液終止反應后,產物變為黃色;用酶標儀在450nm波長測定各反應孔中的吸光值,即可知樣品是否含有特異性抗體。
五、雞新城疫抗體檢測試劑盒組成
酶標板、酶標記物、樣品稀釋液、濃縮洗滌液、底物液A、底物液B、陽性對照、陰性對照
六、儲存及有效期
于2~8℃避光保存,有效期為12個月。
包被板開封后請于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限為2個月。
【樣品準備】
1.血清/血漿:取動物全血按常規方法制備血清或血漿,要求血清/血漿清亮,無溶血、無污染。樣品1周內可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
蛋黃:取2ml新鮮蛋黃加2ml生理鹽水震蕩混勻,3000轉/分鐘離心15分鐘,取上清作為樣本。
2.待檢血清、血漿或已處理蛋黃樣本恢復室溫、混勻待用。陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋成工作洗滌液(如19份蒸餾水或去離子水+1份濃縮洗滌液)。
【檢驗方法】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照50μl;樣品孔每孔先加入40μl工作洗滌液,再加入10μl待檢樣本。
4.每孔加抗體工作液50μl,混勻,蓋好蓋板膜,置37℃(推薦水浴)避光反應30分鐘。
5.甩去孔內液體,每孔加350μl工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,最后一次拍干。
6.每孔加酶標記物100μl,蓋好蓋板膜,置37℃避光反應30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻蓋好蓋板膜,置37℃避光反應15分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。