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供貨周期 | 現貨 | 應用領域 | 食品,農業 |
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深圳艾瑞斯生產的土霉素ELISA檢測試劑盒原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測組織、蜂蜜、雞蛋等樣本中的土霉素藥物(Oxytetracycline,OTC),試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標準品或樣品溶液,樣本中的土霉素藥物和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗土霉素藥物抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含土霉素藥物含量成負相關,與標準曲線比較即可得出樣本中土霉素藥物的殘留量。
土霉素ELISA檢測試劑盒技術指標
2.1 試劑盒靈敏度:0.05ppb(ng/ml)
2.2 反應模式:37℃,30min~30min~15min
2.3 檢測下限:
組織、肝臟、雞蛋………………0.4ppb
蜂蜜………………………………2ppb
尿樣………………………………0.5ppb
2.4 交叉反應率:
四環素………………………………100%
土霉素………………………………100%
金霉素………………………………16.7%
強力霉素……………………………4.2%
2.5 樣本回收率:
組織、肝臟、雞蛋…………85±20%
蜂蜜…………………………75±20%
尿樣…………………………80±20%
3 試劑盒組成
酶標板………………………96孔
高濃度標準品溶液1瓶:(1ml/瓶)1.0ppm(高標準液有揮發性,需注意密封)
標準品溶液0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb(均為空瓶子,現配現用)。
酶標記物(紅蓋)…………………11ml
抗體工作液(藍蓋)………………5.5ml
底物液A(白蓋)……………………6ml
底物液B(黑蓋)……………………6ml
終止液(黃蓋)………………………6ml
20×濃縮洗滌液(白蓋)……………40ml
5×復溶液(黃蓋)…………………50ml
說明書………………………………1份
酶聯免疫試驗步驟
將所需試劑從4℃冷藏環境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結晶需恢復到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
實驗開始前需配制標準品應用液;低濃度的標準品不穩定,需現配現用。
在0ppb的瓶中加復溶液3ml,0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb的瓶中分別加復溶液2ml,4.05ppb的瓶中加復溶液3ml。
標準液6:取1.0ppm高濃度標準品溶液12ul加入裝有3ml 復溶液4.05ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為4.05ppb。
標準液5:取1ml標準液6加入裝有2ml 復溶液1.35ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為1.35ppb。
標準液4:取1ml標準液5加入裝有2ml 復溶液0.45ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為0.45ppb。
標準液3:取1ml標準液4加入裝有2ml 復溶液0.15ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為0.15ppb。
標準液2:取1ml標準液3加入裝有2ml 復溶液0.05ppb的瓶中,蓋緊,混勻,濃度即為0.05ppb。
標準液1:直接使用復溶液,濃度即為0ppb。
1 編 號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
2 加樣反應:加標準品應用液或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加抗體工作液50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光反應30分鐘。
3 洗 滌:將孔內液體甩干,用工作洗滌液350µl/孔充分洗滌5次,每次間隔30秒,最后用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
4 加酶反應:加酶標記物100µl/孔,37℃避光反應30分鐘。
5 洗 滌:同上
6 顯 色:加底物液A 50µl/孔,再加底物液B 50µl/孔,輕輕振蕩5秒混勻,37℃避光顯色15分鐘(若藍色過淺,可適當延長反應時間)。
7 終 止:加終止液50µl/孔,輕輕振蕩混勻,終止反應。
8 測吸光值:用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應在終止反應后10分鐘內完成