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- 艾瑞斯 品牌
- 生產(chǎn)商 廠商性質(zhì)
- 深圳市 所在地
訪問次數(shù):196更新時(shí)間:2023-06-08 11:16:17
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供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 食品,農(nóng)業(yè) |
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深圳艾瑞斯生產(chǎn)的磺胺對甲氧嘧啶檢測試劑盒原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測組織、血清、蜂蜜、牛奶、尿液等樣本中的磺胺對甲氧嘧啶(SMD),試劑盒由預(yù)包被偶聯(lián)抗原的酶標(biāo)板、酶標(biāo)記物、抗體、標(biāo)準(zhǔn)品及其他配套試劑組成。檢測時(shí),加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品溶液,樣本中的磺胺對甲氧嘧啶和酶標(biāo)板上預(yù)包被偶聯(lián)抗原競爭抗磺胺對甲氧嘧啶抗體,加入酶標(biāo)記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含磺胺對甲氧嘧啶含量成負(fù)相關(guān),與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出樣本中磺胺對甲氧啶的殘留量。
磺胺對甲氧嘧啶檢測試劑盒技術(shù)指標(biāo)
2.1 試劑盒靈敏度:0.05ppb(ng/ml)
2.2 反應(yīng)模式:25℃,45min~15min
2.3 檢測下限:
組織(高檢測限方法)……………0.05ppb
組織(低檢測限方法)……………0.25ppb
血清、尿液…………………………0.2ppb
蜂蜜…………………………………0.05ppb
牛奶…………………………………1ppb
雞蛋…………………………………0.1ppb
2.4 交叉反應(yīng)率:
磺胺對甲氧啶(SMD) ……………100%
磺胺啶(SD)………………………40%
磺胺甲基啶(SM1) ………………25%
磺胺鄰二甲氧啶(SDM')…………35%
2.5 樣本回收率:
組織、蜂蜜………………………95±25%
尿樣、牛奶、血清、雞蛋………………85±25%
3 試劑盒組成
酶標(biāo)板……………………………96孔
標(biāo)準(zhǔn)液:各1ml
0ppb、0.05ppb、0.15ppb、0.45ppb、1.35ppb、4.05ppb
酶標(biāo)記物(紅蓋)……………………5.5ml
抗體工作液(藍(lán)蓋)…………………5.5ml
底物液A(白蓋)……………………6ml
底物液B(黑蓋)……………………6ml
終止液(黃蓋)………………………6ml
20×濃縮洗滌液(白蓋)……………40ml
2×復(fù)溶液(黃蓋) …………………50ml
說明書…………………………………1份
蓋板膜…………………………………1張
自封袋…………………………………1個(gè)
酶聯(lián)免疫試驗(yàn)步驟
將所需試劑從4℃冷藏環(huán)境中取出,置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時(shí)可能會(huì)有結(jié)晶需恢復(fù)到室溫以充分溶解,每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數(shù)量的微孔板及框架,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
1 編 號(hào):將樣本和標(biāo)準(zhǔn)品對應(yīng)微孔按序編號(hào),每個(gè)樣本和標(biāo)準(zhǔn)品做2孔平行,并記錄標(biāo)準(zhǔn)孔和樣本孔所在的位置。
2 加樣反應(yīng):加標(biāo)準(zhǔn)品或樣本50µl/孔到各自的微孔中,然后加酶標(biāo)記物50µl/孔,再加入50µl/孔的抗體工作液,用蓋板膜封板,輕輕振蕩5秒混勻,25℃反應(yīng)45分鐘。
3 洗 滌:小心揭開蓋板膜,甩去孔內(nèi)液體,每孔加350ul工作洗滌液,靜置30秒后棄去,重復(fù)洗滌5次,最后一次拍干(用吸水紙拍干,拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破)。
4 顯 色:每孔加入底物液A 50µl,再加底物液B 50µl,輕輕振蕩5秒混勻,25℃避光顯色15分鐘(若藍(lán)色過淺,可適當(dāng)延長反應(yīng)時(shí)間)。
5 終 止:每孔加入終止液50µl,輕輕振蕩混勻,終止反應(yīng)。
6 測吸光值:用酶標(biāo)儀于450nm處測定每孔吸光度值(建議用雙波長450/630nm)。測定應(yīng)在終止反應(yīng)后10分鐘內(nèi)完成。
注意事項(xiàng)
1 室溫低于25℃或試劑及樣本沒有回到室溫(25℃)會(huì)導(dǎo)致所有標(biāo)準(zhǔn)的OD值偏低。
2 在洗板過程中如果出現(xiàn)板孔干燥的情況,則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性,重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板拍干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
3 混合要均勻,洗板要徹底,在ELISA分析中的再現(xiàn)性,很大程度上取決于洗板的一致性。
4 在所有孵育過程中,用蓋板膜封住微孔板,避免光線照射。
5 不要使用過了有效期的試劑盒,不要交換使用不同批號(hào)試劑盒中的試劑。
6 顯色液若有任何顏色表明變質(zhì),應(yīng)當(dāng)棄之。0標(biāo)準(zhǔn)的吸光度值小于0.5個(gè)單位(A450nm< 0.5 )時(shí),表示試劑可能變質(zhì)。
7 反應(yīng)終止液有腐蝕性,避免接觸皮膚。