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諾氟沙星酶聯免疫檢測試劑盒原理及用途
諾氟沙星檢測試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測蜂蜜、動物組織(雞肉、豬肉、魚、蝦)、牛奶、奶粉和雞蛋等樣本中的諾氟沙星(Norfloxacin),試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標準品或樣品溶液,樣本中的諾氟沙星和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗諾氟沙星抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含諾氟沙星含量成負相關,與標準曲線比較即可得出樣本中諾氟沙星的殘留量。
適用范圍
諾氟沙星檢測試劑盒可定性、定量檢測動物組織(雞肉、豬肉、魚、蝦)、牛奶、奶粉、雞蛋、蜂蜜等樣本中諾氟沙星的殘留量。
諾氟沙星酶聯免疫檢測試劑盒技術指標
2.1 試劑盒靈敏度:0.1ppb(ng/ml)
2.2 反應模式:25℃,45min~15min。
2.3 檢測下限:
組織(雞肉、豬肉、魚、蝦):0.3ppb 蜂蜜 :0.4ppb 牛奶 :3ppb 奶粉 :6ppb 雞蛋 :3ppb
2.4 交叉反應率:
諾氟沙星:100% 左氧氟沙星:10% 環丙沙星:5% 恩諾沙星:3% 沙拉沙星:2% 其它沙星類藥物交叉反應率均小于0.1%
2.5 樣本回收率:
組織:85%±15% 蜂蜜:85%±15% 牛奶:85%±15% 奶粉:85%±15% 雞蛋:85%±15%
諾氟沙星檢測試劑盒組成
酶標板、標準液(6個)、高標準液、酶標記物、抗體工作液、底物液A、底物液B、終止液、濃縮洗滌液、復溶液
4 需要的器材和試劑
4.1 儀器:酶標儀、打印機、均質器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平(感量0.01g)
4.2 微量移液器:單道20µl-200µl,100µl-1000µl、多道300µl
4.3 試劑:無水乙腈、正己烷、濃HCl
、貯藏條件及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-8℃保存,不要冷凍。
保 質 期:該產品有效期為1年,生產日期見包裝盒。
樣本前處理
1 樣本處理前須知:
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實驗結果。
2 配液:
配液1:0.15M鹽酸溶液
取5ml濃鹽酸,加入去離子水混勻,定容至400ml。
配液2:樣本提取液
量取10ml 0.15M鹽酸溶液(配液1)加入到90ml無水乙腈中混合均勻。
配液3:復溶液
將5×復溶液用去離子水5倍稀釋(1份復溶液加4份去離子水),用于樣本的復溶,復溶液在4℃環境可保存一個月。
配液4:工作洗滌液
將濃縮洗滌液20倍稀釋(1份洗滌液加19份去離子水)。
樣本前處理步驟:
動物組織(雞肉、豬肉、魚、蝦)處理方法
1)稱2.0±0.05g 均質過的組織樣本于50ml離心管中;
2)加入8ml樣本提取液(配液2),振蕩5分鐘,室溫4000轉/分離心10分鐘;
3)取2ml清澈上層有機相至潔凈干燥的10ml玻璃試管中,50-60℃水浴氮氣吹干;
4)加入1ml正己烷,振蕩2分鐘,再加1ml復溶液(配液3),振蕩30秒,室溫4000轉/分離心5分鐘;
5)去除上層正己烷,取下層水相50µl液體用于分析