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環丙沙星檢測試劑盒概要
環丙沙星是一種喹諾酮類抗菌藥,因其具有廣譜抗菌活性和很強的組織穿透能力,因而成為畜禽和水產的專用喹諾酮類抗菌藥物,被大量用于治療、預防和促進生長。但由于其耐藥性和潛在的致癌性,歐盟、日本及我國均制定了在組織中的最高殘留限量。
環丙沙星檢測試劑盒采用ELISA檢測方法,快速便捷即能檢測出樣本環丙沙星的藥殘留量,其方法能最大限度減少操作失誤和工作的強度。
二、環丙沙星檢測試劑盒原理
環丙沙星試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測蜂蜜、動物組織(雞肉、豬肉、魚、蝦)、牛奶、奶粉和雞蛋等樣本中的環丙沙星(Ciprofloxacin,CPFX),試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時,加入標準品或樣品溶液,樣本中的環丙沙星和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗環丙沙星抗體,加入酶標記物后,用TMB底物顯色,樣本吸光度值與其所含環丙沙星含量成負相關,與標準曲線比較即可得出樣本中環丙沙星的殘留量。
三、適用范圍
環丙沙星試劑盒可定性、定量檢測動物組織(雞肉、豬肉、魚、蝦)蜂蜜樣本中環丙沙星的殘留量。
四、 技術指標
2.1 試劑盒靈敏度:0.1ppb(ng/ml)
2.2 反應模式:25℃,45min~15min。
2.3 檢測下限:
組織:0.3ppb 蜂蜜:0.4ppb 牛奶:3ppb 奶粉:6ppb 雞蛋:3ppb
2.4 交叉反應率:
環丙沙星:100% 左氧氟沙星:10% 諾氟沙星:3% 沙拉沙星:2%
其它沙星類藥物交叉反應率均小于0.1%
2.5 樣本回收率:
組織:85%±15% 蜂蜜:85%±15% 牛奶:85%±15% 奶粉:85%±15% 雞蛋:85%±15%
五、環丙沙星快速檢測盒組成
酶標板、標準液(6個)、高標準液、酶標記物、抗體工作液、底物液A、底物液B、終止液、濃縮洗滌液、復溶液
六、貯藏條件及保存期
儲藏條件:試劑盒于2-8℃保存,不要冷凍。
保 質 期:該產品有效期為1年,生產日期見包裝盒。
樣本前處理
5.1 樣本處理前須知:
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭,以避免污染干擾實驗結果。
5.2 配液:
配液1:0.15M鹽酸溶液
取5ml濃鹽酸,加入去離子水混勻,定容至400ml。
配液2:樣本提取液
量取10ml 0.15M鹽酸溶液(配液1)加入到90ml無水乙腈中混合均勻。
配液3:復溶液
將5×復溶液用去離子水5倍稀釋(1份5×復溶液加4份去離子水),用于樣本的復溶,復溶液在4℃環境可保存一個月。
配液4:工作洗滌液
將20×濃縮洗滌液20倍稀釋(1份20×濃縮洗滌液加19份去離子水)。
樣本前處理步驟:
5.3.1 動物組織(雞肉、豬肉、魚、蝦)處理方法
1)稱取2g±0.05g均質過的組織樣本于50ml離心管中;
2)加入8ml樣本提取液(配液2),振蕩5分鐘,室溫4000轉/分離心10分鐘;
3)取2ml清澈上層有機相至潔凈干燥的10ml玻璃試管中,50-60℃水浴氮氣吹干;
4)加入1ml正己烷,振蕩2分鐘,再加1ml復溶液(配液3),振蕩30秒,室溫4000轉/分離心5分鐘;
5)去除上層正己烷,取下層水相50µl液體用于分析。