高內涵圖像分析是指在保持活細胞結構和功能完整性的前提下,在亞顯微形態下同時檢測不同條件對細胞形態、生長、分化、遷移、凋亡、代謝途徑及信號轉導等方面的影響,從單一實驗中獲取大量相關信息,確定其生物活性和潛在毒性。Pavone高內涵細胞力學熒光顯微鏡是功能靈活的高內涵系統。實驗者可以對活細胞或固定后的細胞進行更精確的力學分析。
Pavone高內涵細胞力學熒光顯微鏡結合體外培養以及在線成像功能,使研究人員能夠在接近生理條件下分析細胞和其他生物材料的結構和功能特性??赏瑫r放置2個96孔板,Pavone允許高通量高含量篩選功能特性,包括細胞剛度、粘彈性、粘附、收縮、機械感應等。
核心優勢:
★高通量壓痕★簡單易用★空間充裕★自動控制★生物友好★
新一代平臺將微觀力學表征與光學成像和培養相結合,實現了快速方便的數據收集。
預先校準的光纖傳感器以及預先編程的實驗進程,使得該儀器可以真正節省時間,產生大量有意義的實驗結果。
工作過程:
應用方向:
◆病理學
單細胞病理學:研究癌細胞力學與基因表達之間的關系。
癌癥是一種廣泛研究的疾病,然而機制和基因表達的相互作用,以及它們如何影響疾病進展,是一個相對較新的領域,許多問題尚待解決。
Pavone可以疊加單細胞力和熒光數據,因此可以耦合力基因表達關系。
◆機械藥理學
單細胞機械藥理學:研究細胞力學在疾病中的作用以及與藥物靶化合物的關系。
在藥理學中,機械生物學分析僅限于特定的應用領域,如心臟病,盡管已證明其他領域(如炎癥和纖維化)中機械特性的相關性是相關的。
Pavone能夠篩選大型樣本集的機械特性,從而解開目前尚未發現的藥物干預的潛在線索。
◆生理學
單細胞生理學:研究活細胞的功能特性。
隨著基因組篩查的日益普及,單細胞生理學領域在過去幾十年取得了很大進展。為了全面理解單個細胞的功能方面,如干細胞分化或心肌細胞功能,力或機械特性可以用作讀取參數。
此外,它們可以使用Pavone和/或第三方設備的分析后測序與熒光耦合。
技術介紹:
Pavone高內涵細胞力學熒光顯微鏡的設計充分為機械生物學考慮。直接將力學測量功能與模塊化成像和體外培養集成,可同時容納2塊96孔板。壓痕測試使用Optics11 Life的基于光纖的MEMS傳感器進行,具有高精度、準度和低噪聲水平的優勢。
方法:
◆成像
根據研究需要,可以使用熒光、共焦或其他更專業的成像模式來擴展標準亮場和相位對比成像能力
左圖顯示了Pavone對EGFP染色酵母細胞的熒光和相位對比成像的疊加
◆機械特性
為與生物工作流程相結合而量身定制的,提供了自動化的查找接觸、壓痕和數據分析程序。此外,可采用拖放方式設計半自動事件序列,或以“連續"模式使用儀器,其中觸摸屏界面使研究人員能夠選擇要進行分析的細胞。
◆培養
默認情況下,Pavone包括溫度控制,使用多個加熱元件和先進的控制機制,以確保均勻穩定地加熱到生理溫度。此外,還可以添加CO2和濕度控制模塊,以提供類似培養箱的條件。