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IMCD3 小鼠腎臟內髓集合管3上皮細胞
IMCD3【mIMCD3;mIMCD3】 | |
l 細胞鑒定 | 種屬鑒定已通過 |
l 細胞來源 | 國家資源庫 |
l 細胞背景 | IMCD-3 是一種內髓集合管 (IMCD) 細胞系,由 Michael Rauchman 于 1991 年從 SV40 [Tg(SV40E)bri/7] 早期區域的轉基因小鼠中獲得。來自 IMCD 末端三分之一的小管被顯微解剖并置于培養物中。使用克隆圓柱體對匯合的細胞進行繼代培養和克隆。 |
l 細胞特性
| 1) 來源:小鼠腎 2) 形態:上皮細胞樣,貼壁生長 3) 含量:>1x106 細胞數 4) 規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 5) 用途:僅供科研使用。 |
l 培養條件: | 1) 準備DMEM/F12培養基;優質胎牛血清,10%;雙抗,1%。 2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。 |
l 注意事項:
| 對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法: 1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。 3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養基以保持細胞的生長活力,后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。 3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。 |
l 運輸形式: | 低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉入液氮或直接復蘇,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。 常溫(2) T25瓶復蘇的存活細胞常溫發貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。 |
l 生物安全 | 1. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物安全臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復蘇凍存細胞時始終使用防護手套、衣服和戴上防護面罩。注意:凍存管浸沒在液氮中會泄漏,并會慢慢充滿液氮。解凍時,液氮轉化成氣相可能導致容器爆炸或用危險力吹掉其蓋子,從而產生飛揚的碎屑造成人員傷害。 |