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9012-54-8-纖維素酶
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纖維素酶(β-1,4-葡聚糖-4-葡聚糖水解酶)是降解纖維素生成葡萄糖的一組酶的總稱,它不是單體酶,而是起協(xié)同作用的多組分酶系,是一種復(fù)合酶,主要由外切β-葡聚糖酶、內(nèi)切β-葡聚糖酶和β-葡萄糖苷酶等組成,還有很高活力的木聚糖酶。作用于纖維素以及從纖維素衍生出來(lái)的產(chǎn)物。微生物纖維素酶在轉(zhuǎn)化不溶性纖維素成葡萄糖以及在果蔬汁中破壞細(xì)胞壁從而提高果汁得率等方面具有非常重要的意義。

生物酶  纖維素酶是催化降解纖維素水解而生成葡萄糖和低聚合度纖維的一組酶的總稱,包括葡聚糖內(nèi)切酶、葡聚糖外切酶和纖維二糖酶3個(gè)主要組分,它不是單一種酶,而是起協(xié)同作用的多組分酶系。纖維素酶是一種灰白色粉末或液體。1906年Seilliere在蝸牛的消化液中發(fā)現(xiàn)了纖維素酶纖維素酶可將纖維中的β-1,4-葡萄糖苷鍵水解,生成可溶性的聚合物及D-Chemicalbook葡萄糖。根據(jù)酶的來(lái)源,其相對(duì)分子質(zhì)量低為5000,最高達(dá)400000。最適pH值為4.0~5.0。最適溫度40~60℃。某些金屬離子Mg2+、Cl2+及中性鹽可使本酶活化,另外一些金屬離子Ag2+、Cu2+、Mn2+、Hg2+和染料可使本酶失活。釀酒時(shí)添加纖維素酶能提高糖化效果和出酒率,并降低醪液的黏度。纖維素酶主要來(lái)源于黑曲霉和木霉。

來(lái)源  纖維素酶的來(lái)源非常廣泛,昆蟲(chóng)、軟體動(dòng)物、原生動(dòng)物、細(xì)菌、放線菌、真菌等都能產(chǎn)生纖維素酶。1.細(xì)菌:細(xì)菌產(chǎn)生纖維素酶的量較低,主要是EG,大多數(shù)對(duì)結(jié)晶纖維素沒(méi)有活性,而且所產(chǎn)生的酶是胞內(nèi)酶或吸附在細(xì)菌壁上,很少能分泌到細(xì)胞外,增加了提取純化的困難,在工業(yè)上實(shí)際很少采用。目前研究較多的是纖維素粘菌屬、生孢纖維粘菌屬和纖維桿菌屬。2.放線菌:對(duì)放線菌的研究很少。分枝桿菌和原放線菌幾乎不產(chǎn)纖維素酶或產(chǎn)量極低,產(chǎn)量稍高的主要是黑紅旋絲放線菌、玫瑰色放線菌、纖維放線菌和白玫瑰放線菌。3.真菌:目前用于生產(chǎn)纖維素酶的微生物大多屬于真菌,研究較多的有木霉屬、曲霉屬、根霉屬和漆斑霉菌。它們能產(chǎn)生大量的纖維素酶,其中尤以木霉屬的產(chǎn)量居多。李氏木霉和綠Chemicalbook色木霉等是木霉屬中酶活性較高的菌種。真菌產(chǎn)生三類纖維素酶,能分泌到菌體,一般不聚集形成多酶復(fù)合體,但相互發(fā)生強(qiáng)烈的協(xié)同作用。目前已制成制劑的有綠色木霉、黑曲霉、鐮刀霉,以及擬青霉和斜臥青霉等纖維素酶。4.酵母:由于纖維素酶工業(yè)化生產(chǎn)的需要,要求提高酶的產(chǎn)量、外分泌性和耐熱性。近來(lái)對(duì)纖維素酶基因克隆研究較多。雖然幾乎所有已克隆的基因都能在大腸桿菌中表達(dá),但由于提取困難和表達(dá)水平低,目前將基因表達(dá)方面的研究轉(zhuǎn)向于真核表達(dá)系統(tǒng),目前應(yīng)用較多的是酵母表達(dá)系統(tǒng)。酵母不產(chǎn)生毒素,用其表達(dá)纖維素酶基因,其產(chǎn)物高度糖基化,經(jīng)正確加工修飾后可直接分泌至培養(yǎng)基,表達(dá)水平高。如酵母表達(dá)的CHBⅡ、EGⅠ的產(chǎn)量可達(dá)100mg/L以上,并具有正常的生物學(xué)活性。

應(yīng)用  纖維素酶現(xiàn)在已廣泛地應(yīng)用于紡織、日用化工、造紙、食品發(fā)酵、工業(yè)洗滌、煙草、石油開(kāi)采、廢水處理及飼料等各個(gè)領(lǐng)域,其應(yīng)用前景十分廣闊。天然纖維素酶存在于微生物、某些昆蟲(chóng)和植物中。植物種子萌發(fā)時(shí),纖維素酶水解種皮纖維素,利于出苗。草食反芻動(dòng)物消化道內(nèi)的共生細(xì)菌和原生動(dòng)物能分泌纖維素酶,將纖維素水解為可被吸收的糖。利用微生物分泌的纖維素酶進(jìn)行農(nóng)副產(chǎn)品加工,可生產(chǎn)優(yōu)質(zhì)飼料和葡萄糖。農(nóng)業(yè)上應(yīng)用綠色木霉(富含纖維素酶的一種真菌)進(jìn)行飼料發(fā)酵,可提高纖維素類飼料的Chemicalbook營(yíng)養(yǎng)價(jià)值。纖維素酶制品是分離植物原生質(zhì)體的主要試劑之一,在植物細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)中,常用纖維素酶或蝸牛酶分解去除細(xì)胞壁,以分離獲得需要的原生質(zhì)體。大多數(shù)工業(yè)用的纖維素酶都是葡萄糖苷內(nèi)切酶,含有一個(gè)催化區(qū)和一個(gè)纖維素連接區(qū)。沒(méi)有纖維素連接區(qū)則酶對(duì)于纖維素的活性很低。有人對(duì)纖維素酶和蛋白酶進(jìn)行了對(duì)照研究,發(fā)現(xiàn)纖維素酶的活性與吸附的強(qiáng)弱關(guān)系更大。Trichodermareesei的纖維二糖水解酶催化區(qū)域169位的氨基酸殘基Tyr能協(xié)助葡萄糖環(huán)轉(zhuǎn)換成更容易反應(yīng)的構(gòu)型。


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