詳細介紹
DMEM培養基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養基,是在MEM培養基的基礎上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量,同時又分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于細胞停泊于一個位置生長,適于生長較快、附著較困難腫瘤細胞等。 [1]
DMEM是 dulbecco's modified eagle medium的縮寫,所以其特點主要包括以下:(1)氨基酸含量為依格爾培養基的2倍,且含有非必需氨基酸,如甘氨酸等;(2)維生素含量為依格爾培養基的4倍;3)含有糖酵解途徑中的重要物質--丙酮酸;(4)含有微量的鐵離子。經典的培養基有很多種,其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是應用廣泛的培養基。其他 如 M199 、 IMDM 、 L15培養基等也用于某些細胞的培養。其具體的特征及應用如下:
1、BME細胞培養基
基礎Eagle培養基(Basal Medium Eagle),1955年Eagle設計,BSS+12種氨基酸+谷氨酰胺+8種維生素。簡單、便于添加,適于各種傳代細胞系和特殊研究用,在此基礎上改良的細胞培養基品種有MEM、DMEM、IMDM等。
2、MEM細胞培養基
又稱*Eagle培養基(Minimal Essential Medium),1959年在Eagle's基礎培養基(BME)上修改而來,刪去賴氨酸、生物素,氨基酸濃度增加,適合多種細胞單層生長,有可高壓滅菌品種,是一種基本、試用范圍的培養基,但因其營養成分所限,針對生產之特定細胞培養與表達時,并不一定是使用效果或者的培養基。
3、DMEM細胞培養基
DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養基,起初是為小鼠成纖維細胞設計的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍,維生素濃度是MEM的4倍,采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L,后來為了某些細胞的生長需要,將葡萄糖含量又調整為4500 mg/L,這就是大家常說的低糖和高糖了。
低糖適于依賴性貼壁細胞培養,特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細胞培養。高糖更適合高密度懸浮細胞培養,也適用于附著性較差,但又不希望它脫離原來生長點的克隆培養,也可用于雜交瘤中骨髓瘤細胞和DNA轉染的轉化細胞的培養。例如CHO細胞表達生產乙肝疫苗、CHO細胞表達EPO。
4、IMDM細胞培養基
Guilber 和Iscove將Dulbecco' Medium 改良為 Iscove's Medium,用于培養紅細胞和巨噬細胞前體。此種培養液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進小鼠B淋巴細胞,LPS刺激的B細胞,骨髓造血細胞,T細胞和淋巴瘤細胞的生長。IMDM為營養非常豐富的培養液,因此可以用于高密度細胞的快速增殖培養。
5、RPMI-1640細胞培養基
Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制,針對淋巴細胞培養設計,含BSS+21種氨基酸+維生素11種等。現也用于懸浮細胞培養,如哺乳動物、特殊造血細胞、正常或惡性增生的白細胞,雜交瘤細胞的培養,其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細胞、T細胞淋巴瘤細胞以及HCT-15上皮細胞等均可參考使用。
名稱 | BRL (大鼠肝細胞) (種屬鑒定正確) |
別稱 | Buffalo Rat Liver |
種屬 | 大鼠 |
組織來源 | 肝 |
生長特性 | 貼壁細胞 |
細胞形態 | 上皮細胞樣 |
生物安全等級 | 1 |
生長培養基 | DMEM(PM150210)+10% FBS(164210-500)+1% P/S(PB180120) |
推薦傳代比例 | 1:2-1:4 |
推薦換液頻率 | 2~3次/周 |
凍存條件 | 凍存液:55% 基礎培養基+40%FBS+5%DMSO溫度:液氮 |
培養條件 | 氣相:空氣,95%;CO2,5%溫度:37℃ |
保藏機構 | RCB; RCB0273 |