詳細(xì)介紹
Rosetta-gami(DE3)PLysS
產(chǎn)品簡介
Rosetta 2 來源于 Rosetta,本菌株含有 pRARE2 質(zhì)粒,除了能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的
AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個稀有密碼子的 tRNA 外,還提供了第七個稀有密碼子
CGG 的 tRNA。Rosetta2 載體通過提供稀有密碼子,使得該宿主菌相對于其他大腸桿菌,能夠提供
更加“通用”的蛋白質(zhì)表達(dá),從而提升目的蛋白表達(dá)水平。同時,pRARE2 質(zhì)粒具有氯霉素抗性。經(jīng)
PUC18 質(zhì)粒檢測,感受態(tài)細(xì)胞的效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
CC96143-01
CC96143-02
CC96143-03
Rosetta 2 感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm pRARE2 (CamR)
Rosetta-gami(DE3)PLysS
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
除 pRARE2 外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
Rosetta-gami(DE3)PLysS
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保.高轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。
產(chǎn)品簡介
Rosetta 2 來源于 Rosetta,本菌株含有 pRARE2 質(zhì)粒,除了能夠提供原 Rosetta(DE3)宿主菌含有 的
AUA, AGG, AGA, CUA, CCC, 和 GGA 六個稀有密碼子的 tRNA 外,還提供了第七個稀有密碼子
CGG 的 tRNA。Rosetta2 載體通過提供稀有密碼子,使得該宿主菌相對于其他大腸桿菌,能夠提供
更加“通用”的蛋白質(zhì)表達(dá),從而提升目的蛋白表達(dá)水平。同時,pRARE2 質(zhì)粒具有氯霉素抗性。經(jīng)
PUC18 質(zhì)粒檢測,感受態(tài)細(xì)胞的效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。
產(chǎn)品組成
組分
CC96143-01
CC96143-02
CC96143-03
Rosetta 2 感受態(tài)細(xì)胞
10 × 100 μL
100 × 100 μL
定制
基因型:F- ompT hsdSB (rB- mB-) gal dcm pRARE2 (CamR)
存儲條件
-80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。
質(zhì)量控制
除 pRARE2 外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留;
化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。
使用方法
1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰水浴中融化;
2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min;
3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰水浴中靜置 2-3 min;
4. 向離心管中加入 900μL LB 或 SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),然后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min;
5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。
注意事項
1. 感受態(tài)細(xì)胞冰水浴中解凍后應(yīng)立即使用;
2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/10;
3. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可;
4. 為確保.高轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。