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Origami(DE3)化轉(zhuǎn)表達(dá)感受態(tài)

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產(chǎn)品簡介

供貨周期 現(xiàn)貨 應(yīng)用領(lǐng)域 生物產(chǎn)業(yè)
Origami(DE3)化轉(zhuǎn)表達(dá)感受態(tài)
菌株來源于 JM109,用于高效表達(dá)克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達(dá)載體(如 pET 系 列)的基因。λ 噬菌體 DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區(qū)整合于 JM109 的染色體上,所以稱為 JM109(DE3)。可同時表達(dá) T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEX,
pMAL

詳細(xì)介紹

Origami(DE3)化轉(zhuǎn)表達(dá)感受態(tài)

產(chǎn)品簡介 JM109(DE3)菌株來源于 JM109,用于高效表達(dá)克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達(dá)載體(pET )的基因。λ 噬菌體 DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區(qū)整合于 JM109 的染色體上,所以稱 JM109(DE3)。可同時表達(dá) T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEXpMAL 等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。JM109(DE3)菌株不可用于藍(lán)白斑篩選試驗。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測, JM109(DE3)感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA存儲條件 -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 質(zhì)量控制 pRARE 外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留; 化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA使用方法 1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min4. 向離心管中加入 900 μL LB SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。

Origami(DE3)化轉(zhuǎn)表達(dá)感受態(tài)

注意事項 1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用; 2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/103. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可; 4. 為確保.高轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。產(chǎn)品簡介 JM109(DE3)菌株來源于 JM109,用于高效表達(dá)克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達(dá)載體(pET )的基因。λ 噬菌體 DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區(qū)整合于 JM109 的染色體上,所以稱 JM109(DE3)。可同時表達(dá) T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEXpMAL 等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。JM109(DE3)菌株不可用于藍(lán)白斑篩選試驗。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測, JM109(DE3)感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。  存儲條件 -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 質(zhì)量控制 pRARE 外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留; 化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA使用方法 1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min4. 向離心管中加入 900 μL LB SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。 注意事項 1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用;

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2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/103. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可; 4. 為確保.高轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。產(chǎn)品簡介 JM109(DE3)菌株來源于 JM109,用于高效表達(dá)克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達(dá)載體(pET )的基因。λ 噬菌體 DE3 區(qū)含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區(qū)整合于 JM109 的染色體上,所以稱 JM109(DE3)。可同時表達(dá) T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEXpMAL 等質(zhì)粒的蛋白表達(dá)。JM109(DE3)菌株不可用于藍(lán)白斑篩選試驗。經(jīng) pUC18 質(zhì)粒轉(zhuǎn)化檢測, JM109(DE3)感受態(tài)細(xì)胞的轉(zhuǎn)化效率可達(dá) 108 cfu/μg DNA。  存儲條件 -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 質(zhì)量控制 pRARE 外,無外源質(zhì)粒 DNA 殘留; 化學(xué)法轉(zhuǎn)化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA使用方法 1. 將感受態(tài)細(xì)胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 將待轉(zhuǎn)化 DNA 加入到 100 μL 感受態(tài)細(xì)胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min; 4. 向離心管中加入 900 μL LB SOC 培養(yǎng)基(室溫或 37 ℃預(yù)熱),后置于 37 ℃搖床復(fù)壯 45 min5. 取不同體積的轉(zhuǎn)化產(chǎn)物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)過夜。 注意事項 1. 感受態(tài)細(xì)胞冰浴中解凍后應(yīng)立即使用; 2. 加入的待轉(zhuǎn)化 DNA 的總體積不應(yīng)超過感受態(tài)細(xì)胞體積的 1/103. 加入待轉(zhuǎn)化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態(tài)細(xì)胞,僅用手指輕彈即可; 4. 為確保.高轉(zhuǎn)化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。

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