詳細介紹
NovaBlue (DE3)化轉表達感受態
產品簡介 JM109(DE3)菌株來源于 JM109,用于高效表達克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達載體(如 pET 系 列)的基因。λ 噬菌體 DE3 區含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區整合于 JM109 的染色體上,所以稱 為 JM109(DE3)。可同時表達 T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEX, pMAL 等質粒的蛋白表達。JM109(DE3)菌株不可用于藍白斑篩選試驗。經 pUC18 質粒轉化檢測, JM109(DE3)感受態細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。 存儲條件 -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 質量控制 除 pRARE 外,無外源質粒 DNA 殘留; 化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。 使用方法 1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min; 3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min; 4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min; 5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。
NovaBlue (DE3)化轉表達感受態
注意事項 1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用; 2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10; 3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可; 4. 為確保.高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。產品簡介 JM109(DE3)菌株來源于 JM109,用于高效表達克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達載體(如 pET 系 列)的基因。λ 噬菌體 DE3 區含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區整合于 JM109 的染色體上,所以稱 為 JM109(DE3)。可同時表達 T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEX, pMAL 等質粒的蛋白表達。JM109(DE3)菌株不可用于藍白斑篩選試驗。經 pUC18 質粒轉化檢測, JM109(DE3)感受態細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。 存儲條件 -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 質量控制 除 pRARE 外,無外源質粒 DNA 殘留; 化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。 使用方法 1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min; 3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min; 4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min; 5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。 注意事項 1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用;
NovaBlue (DE3)化轉表達感受態
2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10; 3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可; 4. 為確保.高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。產品簡介 JM109(DE3)菌株來源于 JM109,用于高效表達克隆于含有噬菌體 T7 啟動子的表達載體(如 pET 系 列)的基因。λ 噬菌體 DE3 區含有 T7 噬菌體 RNA 聚合酶,該區整合于 JM109 的染色體上,所以稱 為 JM109(DE3)。可同時表達 T7 RNA 聚合酶和大腸桿菌 RNA 聚合酶,用于 pET 系列,pGEX, pMAL 等質粒的蛋白表達。JM109(DE3)菌株不可用于藍白斑篩選試驗。經 pUC18 質粒轉化檢測, JM109(DE3)感受態細胞的轉化效率可達 108 cfu/μg DNA。 存儲條件 -80 ℃保存;請勿將本品置于-20 ℃或者液氮中保存。 質量控制 除 pRARE 外,無外源質粒 DNA 殘留; 化學法轉化效率≥108 cfu/μg pUC18 DNA。 使用方法 1. 將感受態細胞從-80 ℃中取出,置于冰浴中融化; 2. 將待轉化 DNA 加入到 100 μL 感受態細胞中,輕輕彈勻,冰上孵育 30 min; 3. 將離心管置于 42 ℃水浴鍋中,不要晃動,熱激 90s 后,立刻置于冰浴中靜置 2-3 min; 4. 向離心管中加入 900 μL LB 或 SOC 培養基(室溫或 37 ℃預熱),后置于 37 ℃搖床復壯 45 min; 5. 取不同體積的轉化產物,用無菌涂布棒均勻涂布于正確抗性的平板上,于 37 ℃培養箱培養過夜。 注意事項 1. 感受態細胞冰浴中解凍后應立即使用; 2. 加入的待轉化 DNA 的總體積不應超過感受態細胞體積的 1/10; 3. 加入待轉化 DNA 后,不要用移液器吹吸感受態細胞,僅用手指輕彈即可; 4. 為確保.高轉化效率,整個操作過程中除熱激外均要保持低溫,并且要盡量輕柔。