詳細介紹
李斯特氏菌顯色培養基是青島高科園海博生物技術有限公司研制,可快速檢測食品和藥品中單增李斯特氏菌。陰性結果可在3天內檢測完成。單增李斯特氏菌顯藍色,菌落周圍有一不透明環。蛋白胨提供氮源和氨基酸,氯化鈉維持滲透壓,瓊脂是凝固劑,氯化鋰抑制革蘭氏陰性菌生長,抑菌劑抑制除李氏菌外的革蘭氏陽性菌生長。
成份(g/L)
營養物質 | 70.0 |
顯色劑 | 6.0 |
pH 7.2±0.2 25℃ |
李斯特氏菌添加劑6.0g、李斯特氏菌抑菌劑(凍干粉)1ml*5支 (已配套,無需另購)
此配方可以進行改良或增加營養成份以獲得最佳的結果。
用法
稱取基礎培養基 14.2g 加入 180ml 蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取 1.2g 李斯特氏菌添加劑,加入 20ml 無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動 1-2min,使其混合均勻,將二者分別于 121℃ 高壓滅菌 15 min。冷至 50℃ 左右時,把李斯特氏菌添加劑加入基礎培養基中,并加入復溶后的李斯特氏菌抑菌劑1 支,混勻,傾入無菌平皿。使培養基的厚度約為 2-3mm,這樣有利觀察不透明環。
操作步驟
使用前,把制備好的培養基放置室溫 10-20 分鐘。
1、按SN標準、GB標準、FDA標準、ISO標準或其它標準制備樣品液;
2、把樣品液加入李氏增菌肉湯(LB1、LB2)中增菌;或把樣品液和Half-Fraser增菌液按照 1:10 的比例混勻,30℃ 培養 24 小時;或其它增菌液中增菌培養;
3、取一環增菌液劃線接種到李斯特氏菌顯色培養基上,36℃±1℃ 培養 24-48 小時。
質量控制
1、外觀
此干燥培養基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色。制備好的平板呈不透明乳白色培養基。
2、微生物試驗
質控菌株 | ATCC | 生長情況 | 菌落顏色 | 不透明環 |
單增李斯特氏菌 | 19114 | +++ | 藍色 | + |
綿羊李斯特氏菌 | CICC21663 | +++ | 藍色 | + |
斯氏李斯特氏菌 | CICC21671 | +++ | 藍色 | - |
金黃色葡萄球菌 | 25923 | - | - | - |
大腸埃希氏菌 | 25922 | - | - | - |
鼠傷寒沙門氏菌 | 14028 | - | - | - |
黑曲霉 | 16404 | - | - | - |
典型特征
單增李斯特氏菌 36℃±1℃ 培養 24-28 小時,平板上出現藍色菌落,菌落周圍有一不透明環。綿羊李斯特氏菌 36℃±1℃ 培養 48 小時,平板上出現藍色菌落,菌落周圍有一不透明環。斯氏李斯特氏菌 36℃±1℃ 培養 24-48 小時,平板上出現藍色菌落,菌落周圍沒有不透明環。在食品檢測中綿羊李斯特氏菌非常少見。
貯存
制備好的固體平板保存于2-8℃,應避免光線直接照射。干燥培養基應放置于陰暗干燥處, 保存溫度 2-8℃。
失效
干燥培養基超過保質期、結塊和顏色變化都不能使用。
此培養基僅供實驗室使用。
參考文獻
1、VAN NETTEN, P., PERALES, J., VAN DE MOOSDIJK, A., CURTIS, G.D.W., a. MOSSEL, D.A.A.: Liquid and solid selective differential media for the detection and enumeration of Listeria monocytogenes. Int. Food Microbiol., 8; 299-316 (1989).
2、HAMMER, G., HAHN, G., KIRCHHOFF, H., a. HEESCHEN, W.: Vergleich der Eignung von Oxford- und PALCAM-Medium zur Isolierung von Listeria monocytogenes aus Weichkse. Dtsch. Milchwirtschaft, 41; 334-336 (1990).
不同細菌在李斯特氏菌顯色培養基上的生長特征:
李斯特氏菌顯色培養基1000ml的微生物靈敏度試驗:
按標簽用法制備培養基,接種以下質控菌株,放置37℃需氧培養24-48小時。