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固相合成多肽的基本原理

閱讀:3073      發布時間:2020-6-12
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  多肽是涉及生物體內各種細胞功能的生物活性物質。它是分子結構介于氨基酸和蛋白質之間的一類化合物,由多種氨基酸按照一定的排列順序通過肽鍵結合而成。到現在,人們已發現和分離出一百多種存在于人體的肽,對于多肽的研究和利用,出現了一個繁榮景象。
 
  多肽的全合成不僅具有很重要的理論意義,而且具有重要的應用價值。通過多肽全合成可以驗證一個新的多肽的結構;
 
  設計新的多肽,用于研究結構與功能的關系;為多肽生物合成反應機制提供重要信息;建立模型酶以及合成新的多肽藥物等。
 
  多肽的化學合成技術無論是液相法還是固相法都已成熟。近幾十年來,固相法合成多肽更以其省時、省力、省料、便于計算機控制、便于普及推廣的突出優勢而成為肽合成的常規方法并擴展到核苷酸合成等其它有機物領域。本文概述了固相合成的基本原理、實驗過程,對其現狀進行分析并展望了今后的發展趨勢。
 
  固相合成多肽的基本原理
 
  多肽合成是一個重復添加氨基酸的過程,合成一般從C端(羧基端)向N端(氨基端)合成。過去的多肽合成是在溶液中進行的,但自從1963年Merrifield發展成功了固相多肽合成方法以來,經過不斷的改進和完善,到今天固相法已成為多肽和蛋白質合成中的一個常用技術,表現出了經典液相合成法*的優點。
 
  其基本原理是:先將所要合成肽鏈的羥末端氨基酸的羥基以共價鍵的結構同一個不溶性的高分子樹脂相連,然后以此結合在固相載體上的氨基酸作為氨基組份經過脫去氨基保護基并同過量的活化羧基組分反應,接長肽鏈。
 
  重復(縮合→洗滌→去保護→中和和洗滌→下一輪縮合)操作,達到所要合成的肽鏈長度,后將肽鏈從樹脂上裂解下來,經過純化等處理,即得所要的多肽。其中α-氨基用BOC(叔丁氧羰基)保護的稱為BOC固相合成法,α-氨基用FMOC(9-芴甲氧羰基)保護的稱為FMOC固相合成法,

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