詳細介紹
一、干細胞培養規劃的基本要求
細胞培養是一種無菌技術,要求工作環境和條件必須保證無微生物和不受其他有害因素的影響。為防止微生物污染和有害因素的影響,細胞培養室要求環境清潔,空氣清新、干燥、無塵。
細胞培養實驗室由無菌操作區、孵育區、制備區、儲藏區、清洗和消毒滅菌區6部分組成,這些區域的共同特點是房間要寬敞、明亮,地面要便于清潔、防滑,墻壁的質地光滑堅硬,儀器設備布局合理,方便操作,避免交叉干擾,陳設簡潔,便于清掃。
二、干細胞培養室無菌操作區
1、更衣室―供更換衣服、鞋子及穿戴帽子和口罩。
2、緩沖間―位于更衣間與操作間之間,用于準備工作,還有防止污染的作用,以保證操作間的無菌環境,同時可放置恒溫培養箱以及必需的小型儀器。
3、無菌操作間―無菌操作間則專用于無菌操作、細胞培養,其大小要適當,且其頂部不宜過高以保證紫外線的滅菌效果;墻壁光滑*以便清洗和消毒,無菌操作間容積小且為密閉式,一般無菌操作間的空氣消毒用紫外線燈,有的實驗室使用無臭氧紫外線消毒器或電子消毒滅菌器。
三、干細胞實驗室的建設環境要求
溫度:儀器還是操作對溫度沒有特殊要求,維持舒適的溫度即可,比如18~26度。
濕度:過高的濕度會導致微生物的滋生,所以建議正常維持濕度在70%以下。
潔凈度:細胞實驗對潔凈區并沒有要求,細胞實驗里面只有細胞操作的時候要求無菌的環境,這時要求有局部的百級,通常可以利用超凈臺或安全柜來實現,不過有時候為了有個更好一點的環境,減小超凈臺過濾器更換的時間,會維持室內的潔凈度,比如萬級的潔凈度。
無菌無毒的操作環境和培養環境是保證細胞在體外培養成功的首要條件。細胞培養對無菌環境要求很高,在細胞操作時,一般需要在100級空氣質量條件下進行。
在體外培養的細胞由于缺乏對微生物和有毒物的防御能力,一旦被微生物或有毒物質污染,或者自身代謝物質積累,可導致細胞中毒死亡。
照明:滿足實驗用的操作照度,通常在300LUX。
干細胞組培實驗室工程——實驗室工程——干細胞組培實驗室工程