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產(chǎn)品簡介
A549 人非小細胞肺癌細胞（通過STR）該細胞系是1972年由GiardDJ通過肺癌組織移植培養(yǎng)建系的，源自一位58歲的白人男性。A549能通過胞苷二磷脂酰膽堿途徑合成富含不飽和脂肪酸的卵磷脂；角蛋白陽性。
詳細介紹
產(chǎn)品名稱
A549 人非小細胞肺癌細胞（通過STR）
（Cat.No：Xk-Y1035）
適用范圍
本產(chǎn)品*于科學(xué)研究，絕不可
作為人類或者動物疾病的治療產(chǎn)品使
用。
*培養(yǎng)基配置
F-12K + 10% FBS + 1% P/S
細胞圖片
產(chǎn)品描述
種屬：
人源（Homo sapiens）
組織：
肺（Lung ）
疾病：
癌（Carcinoma ）
細胞形態(tài)： 上皮細胞樣（Epithelial ）
生長特性： 貼壁生長（Adherent）
培養(yǎng)環(huán)境:
37℃ ， 5% CO2 ，95% AIR
拆包
1. 請立即檢查包裝袋是否有破損或漏液，如有，請拍照并及時與技
術(shù)聯(lián)系。
2.請立即將細胞從包裝盒中取出，并按照下方操作步驟進行處理。
T25 培養(yǎng)瓶中的細胞操作步驟
1. 75%酒精棉球擦拭 T25 細胞培養(yǎng)瓶外部。
2. 顯微鏡觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數(shù)拍照保存（40
×,100×,200×各一張）前三天照片為重要售后依據(jù)，不提供或未
拍照默認收到狀態(tài)良好。
3. 不要打開培養(yǎng)瓶蓋，將細胞放入 37 度培養(yǎng)箱中靜置 3-4 小時后
再做處理，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)
4. 貼壁細胞：若細胞密度較小，無菌操作，去掉培養(yǎng)基。每瓶添加
配制好的*培養(yǎng)基 5-6ml。放到 37 度培養(yǎng)箱培養(yǎng)。待細胞密度到
80%以上，進行傳代。
懸浮細胞：將瓶內(nèi)所有培養(yǎng)基離心收集，重懸計數(shù)根據(jù)密度進行
分瓶，密度在 3x10^5/ml 為宜。
注意：*次傳代比例建議 1:2，之后可根據(jù)細胞密度和增
殖情況適當調(diào)整。
凍存管細胞的操作步驟
1. 收到細胞后，檢查外包裝情況和箱內(nèi)是否還有干冰。如有外包裝
破損干冰已*揮發(fā)等問題，請即時聯(lián)系。
2. 將細胞取出轉(zhuǎn)移至-80 度冰箱(不超過一周）或液氮保存,建議盡早
復(fù)蘇。
3. 復(fù)蘇*管后有活性狀態(tài)問題及時與我們聯(lián)系，會有技術(shù)人員與
您溝通指導(dǎo)后再復(fù)蘇第二管。
注意：為保證細胞的高存活率，收到產(chǎn)品后，請立即解凍
復(fù)蘇細胞。
細胞傳代
1. 細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時，棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)
液，用 PBS 清洗細胞一次；
2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀
察，待細胞回縮變圓后加入 5ml *培養(yǎng)液終止消化，再輕輕吹打
細胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心
5min；
3. 棄上清，沉淀細胞用 1-2ml *培養(yǎng)基重懸，然后按 1:2 比例進
行分瓶傳代，最后放入 37℃，5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞復(fù)蘇
1. 從液氮中取出細胞凍存管（注意：佩戴防爆管面具），快速將其
置入 37℃水浴中解凍，直至凍存管中無結(jié)晶，然后用 75%的酒精擦
拭凍存管外壁；
2. 將凍存管中的細胞移至含 6ml *培養(yǎng)基的 15ml 離心管中，
1000rpm 離心 5min；
3. 棄上清，沉淀用 6ml *培養(yǎng)基重懸，接種 25cm2培養(yǎng)瓶，于 37℃，
5%CO2細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
細胞凍存
1. 細胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的 80%面積時，棄 25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)
液，用 PBS 清洗細胞一次；
2. 添加 0.25%胰蛋白酶消化液約 1ml 至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀
察，待細胞回縮變圓后加入*培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細胞使
之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至 15ml 離心管中，1000rpm 離心 5min；
3. 用適量的凍存液（FBS：DMSO=9 ：1）重懸細胞，并放置于凍
存管中；
4. 先將細胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃過夜，24h
后轉(zhuǎn)入液氮中進行長期保存。使用程序降溫盒可直接放入-80℃。
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