實驗原理:
本試劑盒采用競爭elisa方法,在微孔板包被有右旋糖酐偶聯(lián)抗原,加入右旋糖酐標準品或樣品,游離右旋糖酐與微孔條上預包被的右旋糖酐偶聯(lián)抗原互相競爭抗右旋糖酐抗體酶標記物,用 TMB 底物顯色,加入終止液后顏色由藍色變?yōu)辄S色,用酶標儀在 450nm 波長下進行檢測,吸光值與樣品中右旋糖酐含量成反比,通過標準曲線計算樣品中右旋糖酐的含量。
技術交流:
樣品收集、處理及保存 | 操作步驟 |
1. 細胞培養(yǎng)上清:適用于檢測體外培養(yǎng)的細胞分泌性成份。用無菌管收集細胞上清液,以1000×g離心15分鐘,收集上清。 2. 細胞:用PBS反復洗滌細胞3次,調整細胞濃度達到104 -106/ml 左右,通過反復凍融,使細胞破壞并放出細胞內成份,或者細胞超聲粉碎,離心取上清液檢測。 3. 血清:在室溫下,血液自然凝固,以1000×g離心15分鐘,取上清待測。 4. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合后靜置10-20 分鐘后,以1000×g離心15分鐘,收集上 清。 5. 體液:包括胸腹水、腦脊液,分泌物等。使用不含熱原和內毒素的離心管收集,以1000×g離心15分鐘,收集上清。 6. 組織標本:切取組織標本,稱取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或勻漿器,或超聲破碎儀將標本勻漿,以2000-3000 rmp離心20 分鐘,收集上清進行檢測。 7. 樣品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 8. 保存:如果樣品不能立即檢測,應將其分裝,-70 ℃保存,避免反復冷凍。保存過程中如出現沉淀,應再次離心。血液標本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 | 1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。 2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 3.溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。 4.配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。 5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。 6.加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 7.溫育:操作同3。 8.洗滌:操作同5。 9.顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘。 10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。 11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。 |
客戶須知:
1、液體類標本(細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿、血清、血漿、尿液、胸水、腹水、腦脊液等)。
2、樣本保存:請盡早檢測,2-8℃保存一天;需更長時間須冷凍(-20℃或-70℃)保存。如需周期收集樣本,請將樣本及時分裝標號后,置-20℃或-70℃保存;
3、請?zhí)崆案嬖V我們:您樣本的種屬、樣本數量、待測指標及其他特殊要求。
承諾:
1.有質量問題免費包換,合同上注明了的.(質量問題包括運輸不當,客戶在使用過程中測不出結果,等等!)
2.全程技術指導。(包括售前的標本收集,使用過程中不明白的地方,實驗結束后的數據分析,有任何疑問,我們技術都會即時給你去電)
3.提供免費代測的服務。(你只需把標本寄過來,我們?yōu)槟愎?jié)省時間,幫你出結果,原始數據,分析數據均可提供,一般時間是5天左右)
4.客戶有任何問題,我們都是在一個工作日之內給出解決方案。售后和技術這一塊都是竭誠為客戶服務。