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參考資料 8366

用于癌癥測量的 EGFR 和 MET 基因拷貝數標準

參考材料 (RM) 8366 旨在協調人類表皮生長比率的測量因子基因 (EGFR) 和人類 MET 原癌基因、受體酪氨酸激酶基因 (MET) 到未擴增的參考基因。已經報道了 EGFR 基因擴增和相關的蛋白質表達增加，并與許多人類惡性腫瘤的發病機制有關。 EGFR基因的擴增（增加的拷貝）和幾種癌癥中的蛋白質過表達被用作確定治療和治療的生物標志物預測抗EGFR靶向治療的臨床結果[1]。已在肺癌、胃癌和肝細胞癌中描述了導致蛋白質表達增加和 MET 受體組成型激活的 MET 基因擴增。

NIST SRM 8366 EGFR和MET 基因拷貝數標準

進行了各種臨床試驗以評估其安全性和有效性癌癥患者的選擇性 MET 抑制劑。然而，準確可靠地評估 MET 水平仍然是一項挑戰 [2]。 RM 8366 由從六種人類癌細胞系中提取的基因組 DNA 組成，具有不同數量的 EGFR 和 MET 基因擴增。六種純化的基因組 DNA 位于由 10 mmol/L 2-氨基-2-(羥甲基)丙烷-1,3-二醇 (Tris) 和 0.1 mmol/L 乙二胺四乙酸二鈉鹽 (EDTA) pH 8.0 (TE -4. 六種成分是來自人類細胞系A-431、BT-20、C32、Daoy、Hs 746T和SNU-5的基因組DNA材料，并標記為A、B、C、D、E和F，分別。

在 260 nm 處通過吸光度測量確定的組分 A、B、C、D、E 和 F 的濃度分別為 21.6 µg/mL、21.7 µg/mL、21.5 µg/mL、22.9 µg/mL、23.1 µg/mL 和 21.0微克/毫升，分別。在準備稀釋液時，重要的是要考慮各個組分中 EGFR 和 MET 的擴增水平，以確保 EGFR 和 MET 拷貝數在您正在使用的檢測的工作范圍內。一個單位的 RM 由每個組分的一個小瓶組成，其中包含大約 100 μL 的 DNA 溶液。這些小瓶中的每一個都貼有標簽，并且用顏色編碼的螺帽密封。

參考值：

每個參考基因的 EGFR 和 MET 拷貝的參考比率與 95% 可信區間和 95% 預測區間顯示在表 1 和表 2 中。NIST 參考值是 NIST 證書上提供的真實值的最佳估計， NIST [3] 未對所有已知或可疑的偏倚來源進行全面調查的分析證書或調查報告。

NIST SRM 8366 EGFR和MET 基因拷貝數標準

信息值：

表 3 顯示了每微升 EGFR、MET 和參考基因拷貝的信息值。信息值被認為是 RM 用戶感興趣和使用的值，但沒有足夠的信息來評估與該值相關的不確定性或僅進行了有限數量的分析 [3]。信息值不能用于建立計量溯源性。