NIBSC 07/272 東京172亞株卡介苗(標準品)由日本東京 BCG 實驗室于 2006 年制備。2009 年被確定為東京 172 的第一個 WHO 卡介苗參考試劑。本材料的預期用途是作為有效性和一致性的比較或參考活力檢測監測(如培養活菌計數和改良的 ATP 檢測);使用分子生物學技術進行身份測定;以及在臨床前研究中用于評估新型結核病疫苗的體內試驗(如無毒力分枝桿菌、皮膚反應性和保護試驗)。
世界衛生組織參考試劑
東京 172 第一代世界衛生組織卡介苗疫苗參考試劑
子株
NIBSC 07/272
血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。