NIBSC 07/184 流感抗 B(標準品)在綿羊中制備,用于單徑向B/Malaysia/2506/2004 抗原的擴散測定。合適的 NIBSC試劑應包含在每個測定中。抗血清試劑在 SHEEP 471、472 和 473 中制備至B/Malaysia/2506/2004 病毒的純化 HA。提取HA抗原通過用菠蘿蛋白酶處理和純化的純化病毒蔗糖梯度沉降
流感試劑
流感抗 B/Malaysia/2506/2004 HA 血清(綿羊 471,472 和473)
NIBSC 07/184
細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。