NIBSC 06/206 人乳頭瘤病毒18 型(標準品)由冷凍干燥的重組質粒 pBR322 含有通過其*的 EcoR1 位點克隆的全長 HPV18 DNA (Quint et al., 2006)。 EcoR1 克隆位點位于 E1 基因內。該標準已在純化的人類基因組 DNA 的背景下配制,以 0.5 ml 等分試樣凍干并在 -20 °C 下儲存。
世界衛生組織國際標準
第一版 WHO 人乳頭瘤病毒 (HPV) 國際標準
18 型 DNA
NIBSC 06/206
細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融.
7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。