詳細介紹
產品屬性:
產品名稱:坎氏弧菌PCR檢測試劑盒
英文名稱:Vibrio campbelliiPCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
公司產品僅用于科研運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。
相關產品:
霍亂弧菌O群PCR檢測試劑盒
霍亂弧菌PCR檢測試劑盒
霍亂弧菌和群PCR檢測試劑盒
霍亂弧菌通用PCR檢測試劑盒
霍亂弧菌型PCR檢測試劑盒
PCR實驗方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:PCR試劑盒結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4:PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μl進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
使用方法:
一、稀釋標準曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區(qū)域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號管中加入 5 μL 陽性對照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標準曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的標準曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產品跟市場上絕大多數(shù)核酸純化產品兼容。
8. 如果有 N 個樣品,則需要進行 N+2 個樣品提取,多出的一個用作樣品制備陽性對照管、另一個用作樣品制備陰性對照管。
三、設置 qPCR 反應(20μL 體系,在樣品制備室進行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復,則標記 N+9 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),6 個用于標準曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復,則標記 N+4 個 PCR 管,其中 N+2 個用于上步得到的 N+2 個樣品,1 個用于 PCR 陰性對照(用水做模板),1 個用于PCR 陽性對照。
實驗外包:
1.基因組學:基因芯片、SNP檢測、DNA甲基化檢測、生物信息學分析
2.轉錄組學:microRNA芯片、LncRNA芯片、表達譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質組學:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質檢測:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測:HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細胞分選
7.代謝組學:GC-MS、LC-MS、NMR
8.細胞及動物模型:原代細胞、細胞模型、動物模型構建
眼質蛋白ELISA試劑盒 OCLMHuman Estriol, E3 Elisa Kit
眼皮膚白化病Ⅱ蛋白ELISA試劑盒 OCA2Human Tri-iodothyronine, T3 Elisa Kit
巖藻糖激酶ELISA試劑盒 FUKHuman thyroxine, T4 Elisa Kit
巖藻糖基轉移酶9ELISA試劑盒 FUT9Human thyroxine, T4 Elisa Kit
巖藻糖基轉移酶7ELISA試劑盒 FUT7Human Free Thyroxine, FT4 Elisa Kit
巖藻糖基轉移酶6ELISA試劑盒 FUT6Human Free Tri-iodothyronine Indes, Free-T3 Elisa Kit
巖藻糖基轉移酶5ELISA試劑盒 FUT5Human Neonatal Thyroxine, NN-T4 Elisa Kit
巖藻糖基轉移酶4ELISA試劑盒 FUT4Human Insulin, INS Elisa Kit
巖藻糖基轉移酶3ELISA試劑盒 FUT3Human C-Peptide Elisa Kit
巖藻糖基轉移酶2ELISA試劑盒 FUT2Human Chorionic Gonadotrophin, HCG Elisa Kit
巖藻糖基轉移酶1ELISA試劑盒 FUT1Human Chorionic Gonadotrophin β, β-CG Elisa Kit
巖藻糖基轉移酶11ELISA試劑盒 FUT11Human luteotropic hormone, LH Elisa Kit
巖藻糖基轉移酶10ELISA試劑盒 FUT10Human Prednisolone, PS Elisa Kit
巖藻糖變旋酶ELISA試劑盒 FucMHuman Leptin, LEP Elisa Kit
坎氏弧菌PCR檢測試劑盒TYRO蛋白酪氨suan激酶結合蛋白(TYROBP)重組蛋白Recombina TYRO Protein Tyrosine Kinase Binding Protein (TYROBP)
5'-核苷suan酶Ⅲ(5C3)重組蛋白Recombina 5'-Nucleotidase, Cytosolic III (5C3)
血管緊張素轉化酶(ACE)重組蛋白Recombina Angiotensin I Converting Enzyme (ACE)
絲裂原激活蛋白激酶10(MAPK10)重組蛋白Recomb?