詳細(xì)介紹
產(chǎn)品屬性:
產(chǎn)品名稱:普雷沃菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱:Prevotella spp.PCR
規(guī)格:50T
分類:PCR檢測(cè)試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
公司產(chǎn)品僅用于科研運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
相關(guān)產(chǎn)品:
C型產(chǎn)氣莢膜桿菌(CP-C)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
病毒N8亞型(AIV-N8)PCR檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
生孢梭菌(生孢梭狀芽孢桿菌)探針法熒光定量PCR試劑盒
流感病毒H3N2亞型PCR檢測(cè)試劑盒(熒光PCR法)
牛腺病毒(4-8型)通用探針法熒光定量PCR試劑盒
PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟:
方法
1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。
3:PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
使用方法:
一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。
1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。
3. 在 7 號(hào)管中加入 5 μL 陽性對(duì)照(濃度為 1×10E8 拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E7 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
4. 換槍頭,在 6 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 5 號(hào)管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DNA 的制備
7. 用自選方法純化樣品的 DNA,本產(chǎn)品跟市場(chǎng)上絕大多數(shù)核酸純化產(chǎn)品兼容。
8. 如果有 N 個(gè)樣品,則需要進(jìn)行 N+2 個(gè)樣品提取,多出的一個(gè)用作樣品制備陽性對(duì)照管、另一個(gè)用作樣品制備陰性對(duì)照管。
三、設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
9. 如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析,并且只做 1 次重復(fù),則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管,其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品,1 個(gè)用于 PCR 陰性對(duì)照(用水做模板),1 個(gè)用于PCR 陽性對(duì)照。
實(shí)驗(yàn)外包:
1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析
2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq
3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、熒光、ELISA
6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、組化、流式細(xì)胞分選
7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR
8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建
Syaxin 5(STX5)ELISA Kit肽-主要組織相容性復(fù)合體復(fù)合物ELISA試劑盒 pMHC免費(fèi)代測(cè)試劑
Syaxin 4(STX4)ELISA Kit炭疽熱毒素受體2ELISA試劑盒 AXR2免費(fèi)代測(cè)試劑
Syaxin 3(STX3)ELISA Kit碳分解代謝物阻遏4樣蛋白ELISA試劑盒 CCRN4L免費(fèi)代測(cè)試劑
Syaxin 1B(STX1B)ELISA Kit碳suan酐酶12ELISA試劑盒 CA-12免費(fèi)代測(cè)試劑
Syaxin 19(STX19)ELISA Kit碳suan酐酶2ELISA試劑盒 CA2免費(fèi)代測(cè)試劑
Syaxin 18(STX18)ELISA Kit碳suan酐酶3ELISA試劑盒 CA3免費(fèi)代測(cè)試劑
Syaxin 17(STX17)ELISA Kit碳suan酐酶6ELISA試劑盒 CA-6免費(fèi)代測(cè)試劑
Syaxin 16(STX16)ELISA Kit碳suan酐酶ⅢELISA試劑盒 CA3免費(fèi)代測(cè)試劑
Syaxin 12(STX12)ELISA Kit碳suan酐酶ⅣELISA試劑盒 CA4免費(fèi)代測(cè)試劑
Syaxin 11(STX11)ELISA Kit碳suan酐酶ⅤBELISA試劑盒 CA5B免費(fèi)代測(cè)試劑
Syaxin 10(STX10)ELISA Kit碳suan酐酶ⅥELISA試劑盒 CA6免費(fèi)代測(cè)試劑
Synaptotagmin Like Protein 2(SYTL2)ELISA Kit碳suan酐酶ⅫELISA試劑盒 CA12免費(fèi)代測(cè)試劑
普雷沃菌屬通用PCR檢測(cè)試劑盒彈性3B(ELA3B)重組蛋白R(shí)ecombina Elastase 3B (ELA3B)
糜原B1(CTRB1)重組蛋白R(shí)ecombina Chymotrypsinogen B1 (CTRB1)
尿黑suan1,2-雙加氧酶(HGD)重組蛋白R(shí)ecombina Homogeisate-1,2-Dioxygenase (HGD)
4-羥基苯suan雙加氧酶(HPD)重組蛋白R(shí)ecombina 4-Hydroxyphenylpyruvate Dioxygenase (HPD)
脯氨suan-4-羥化酶α多肽Ⅰ?