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肉毒堿棕櫚酰轉移酶(CPT1)可見分光光度法

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更新時間:2022-03-10 14:34:02瀏覽次數:295

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產品簡介

供貨周期 現貨 規格 50管/48樣
貨號 YS-01S6727 應用領域 化工
主要用途 公司產品僅供于科研使用    
肉毒堿棕櫚酰轉移酶(CPT1)可見分光光度法公司正在熱銷的產品:PYY小鼠YY肽ELISA檢測試劑盒
XRCC6小鼠X-射線修復交叉互補蛋白6ELISA方法
XRCC5小鼠X-射線修復交叉互補蛋白5ELISA方法
XBP1小鼠X-框結合蛋白1ELISA檢測試劑盒
WFS1小鼠Wolfram綜合征蛋白1ELISA方法

詳細介紹

圖片1.png

商品屬性:

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

肉毒堿棕櫚酰轉移酶(CPT1)可見分光光度法

50管/48樣

可見分光光度法

YS-01S6727

商品介紹:

公司產品僅用于科研測定意義
肉毒堿棕櫚酰轉移酶是存在于線粒體內膜的一類酰基轉移酶。可逆地催化從酰基輔a將酰基轉移至L-肉毒堿的反應,在轉運脂肪酸通過線粒體內膜的過程中起重要作用。                         

測定原理:

基于肉堿和脂酰輔a在丙二酰輔a存在與否的條件下,通過肉堿脂酰轉移酶(CPT-I)的作用,產生脂酰肉堿,并釋放出巰基輔a(COA-SH),與Ellman試劑DN-TB反應后,產生黃色的TNB。通過其吸收峰值得變化(412nm),來定量分析CPT-1的活性。

需自備的儀器和用品:

可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水

試劑組成和配制:

試劑一:液體×1瓶,4℃保存。

試劑二:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑三:液體×1瓶,4℃避光保存。

試劑四:液體×1瓶,4℃避光保存,未變成藍綠色之前均可使用。

標準品:液體×1支(EP管中),2 μmol/mL酚標準液,4℃保存。

粗酶液提取:

1. 組織:按照組織質量(g):試劑一體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL試劑一)進行冰浴勻漿,4℃、8000g離心10min,取上清液待測。

2. 細菌或細胞:按照細菌或細胞數量(104個):試劑一體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細胞加入1mL試劑一),冰浴超聲波破碎細胞(功率300w,超聲3秒,間隔7秒,總時間3min);然后8000g,4℃,離心10min,取上清置于冰上待測。

3. 血液可直接測定,或者適當稀釋后測定。

測定步驟:

1. 分光光度計/酶標儀預熱30min,調節波長到510 nm,蒸餾水調零。

2. 試劑三置于37℃水浴中預熱30 min。

3. 空白管:取EP管,加入4μL蒸餾水,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A空白管。

4. 標準管:取EP管,加入4μL標準品,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A標準管。

5. 對照管:取EP管,加入4μL上清液,40μL蒸餾水,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。

6. 測定管:取EP管,加入4μL上清液,40μL試劑二,40μL試劑三,混勻后置于37℃水浴中保溫15min;加入試劑四120μL,混勻后于510nm測定吸光度,記為A測定管。

其中標準管和空白管只需做一管,測定管和對照管每個樣均需做。

注意:空白管和標準管只需測定一次。

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