詳細(xì)介紹
需自配儀器:
1、酶標(biāo)儀(比色測定波長為450nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、微量移液器
基本信息:
產(chǎn)品名稱:α半乳糖苷酶(αGAL)微量法
測試方法:微量法
規(guī)格 : 100管/48樣
貨號:YS-01S6813
測定意義
α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,能專一地催化α半乳糖苷鍵的水解,主要參與棉子糖、水蘇糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL對于植物種子的萌發(fā)至關(guān)重要,種子萌發(fā)初期,其催化產(chǎn)生的D-半乳糖通過糖酵解途徑迅速轉(zhuǎn)化和消耗,為種子的萌發(fā)提供最初的能量來源,后期則主要參與細(xì)胞壁儲(chǔ)藏多糖水解。
測定原理:
α-GAL分解對-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基苯酚,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計(jì)算α-GAL活性。
自備用品:
可見分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。
用途范圍:僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些。可以取0.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及枸櫞酸鈉。
下列是公司正在熱銷的產(chǎn)品:
豬抑制蛋白β2(ARRβ2)酶聯(lián)吸附測定試劑盒LactococcusMEK1 (61B12) Mouse mAb (Biotinylated)
豬Rho GDP解離抑制因子α(ARHGDIα)酶聯(lián)吸附測定試劑盒棒曲霉EGF Receptor (E746-A750del Specific) (D6B6) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)
豬血管緊張素II受體2抗體(ANGⅡR2-Ab)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 香茅假單胞Histone H3 (D1H2) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)
豬NOD樣受體(NLR)酶聯(lián)吸附測定試劑盒放射形根瘤c-Kit (D13A2) XP® Rabbit mAb (Biotinylated)
豬蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M1(M-AChRM1)酶聯(lián)吸附測定試劑盒孤島鹽單胞USP9X Antibody
豬成纖維生長因子受體3(FGFR3)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 海南小短桿USP9X Antibody
豬輕肽神經(jīng)絲蛋白(NEFL)酶聯(lián)吸附測定試劑盒梾木生殼針孢Phospho-Smad1 (Ser206) (D40B7) Rabbit mAb
豬轉(zhuǎn)錄因子20(TCF20)酶聯(lián)吸附測定試劑盒植物乳桿植物亞種Phospho-Smad1 (Ser206) (D40B7) Rabbit mAb
豬顆粒酶B(GzmB)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 枯草芽孢桿Phospho-Optineurin (Ser177) Antibody
豬冷球蛋白(CG)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 燼灰紅鏈霉果糖發(fā)酵亞種RCHY1 Antibody
豬白共同抗原(LCA/CD45)酶聯(lián)吸附測定試劑盒賴氨酸芽胞桿屬Phospho-SAPK/JNK (Thr183/Tyr185) (G9) Mouse mAb (PE Conjugate)
豬Sp100核抗原(Sp100)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 根瘤Phospho-Thr-Pro-Pro Motif [pTPP] (D61C3) Rabbit mAb
豬促卵泡素(FSH)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 木蹄層孔Phospho-AMPK Substrate Motif [LXRXX(pS/pT) MultiMab™ Rabbit mAb mix
豬43KDa Tar DNA結(jié)合蛋白(TDP43)酶聯(lián)吸附測定試劑盒黑木耳FNIP2 (D3T8Z) Rabbit mAb
豬角蛋白19(CK-19/KRT19)酶聯(lián)吸附測定試劑盒 植物乳桿Phospho-Histone H2A.X (Ser139) (20E3) Rabbit mAb (PE Conjugate)
α半乳糖苷酶(αGAL)微量法鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體Human ANXA4(Annexin A4) ELISA Kitβ-葡聚糖酶
半胱酸蛋白酶蛋白-6抗體(C端)Human TNNT3(Troponin T, fast skeletal muscle) ELISA Kit透析袋27DM
周期素A2抗體Human RAB11A(Ras-related protein Rab-11A) ELISA Kit人磷脂酰肌醇抗體IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)ELISA試劑盒,PI Ab-IgG/
鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2α抗體Human RELB(Transcription factor RelB) ELISA Kit人抗乙型肝炎病核心抗體(HBcAb)ELISA試劑盒, HBcAb ELISA
鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激酶2b/2γ抗體Human UCHL1(Ubiquitin carboxyl-terminal hydrolase isozyme L1) ELISA Kit人糖蛋白49A(Gp49a)ELISA試劑盒,Gp49a ELISA
凋亡敏感性基因抗體Human PA2G4(ProlifeRation-associated protein 2G4) ELISA Kit人抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒,INH-B ELISA
天冬氨酸-胱氨酸特異性蛋白酶家族抗體Human PDXP(Pyridoxal phosphate phosphatase) ELISA Kit人刀豆素A(ConA)ELISA試劑盒, ConA ELISA
半胱酸蛋白酶-10抗體Human OAS3(2′-5′-oligoadenylate synthase 3) ELISA Kit人色氨酰tRNA合成酶(WARS)ELISA試劑盒,
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后用于測定。