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中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1培養(yǎng)

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更新時間:2018-05-07 16:25:34瀏覽次數(shù):862

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產(chǎn)品簡介

中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1培養(yǎng)只能用于科研,不得用于臨床。應(yīng)用公司細(xì)胞庫細(xì)胞株種類齊全:大鼠腹水癌細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、正常細(xì)胞、耐藥細(xì)胞株。細(xì)胞狀態(tài)良好,飽滿,光澤度好,*,專業(yè)技術(shù)指導(dǎo)。歡迎廣大科研用戶!

詳細(xì)介紹

細(xì)胞名稱  中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1培養(yǎng)
形態(tài)特性 上皮樣

品牌 貼壁生長

特征特性 1957年,Puck TT從成年中國倉鼠卵巢的活檢組織建立了CHO細(xì)胞,CHO-K1是CHO的一個亞克隆。CHO-K1的生長需要脯氨酸。

培養(yǎng)條件 DMEM-H:

Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 15%NBS  

傳代方法 1:

3傳代;3-4天一次  

傳代情況 PN3

凍存條件 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS 

支原體檢測 熒光法(-) 

STR -


中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1培養(yǎng)貼壁細(xì)胞: 對于貼壁細(xì)胞應(yīng)先吸(倒)盡培養(yǎng)基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強(qiáng)度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養(yǎng)瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進(jìn)行消化,(根據(jù)經(jīng)驗(yàn)),晃動使消化液鋪均勻置37度培養(yǎng)箱約2-5分鐘,鏡下見細(xì)胞收縮變圓或少數(shù)脫落后,輕輕振動瓶底使細(xì)胞全部脫落,加入2-3ml*培養(yǎng)基后,輕輕吹打,使細(xì)胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基后繼續(xù)培養(yǎng)或?qū)嶒?yàn)。
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1培養(yǎng)操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng)傳代及凍存:
1.2.1 細(xì)胞的復(fù)蘇培養(yǎng) 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細(xì)胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細(xì)胞的凍存液,加入事先裝好培養(yǎng)液(37℃預(yù)熱,8~10倍體積)離心管內(nèi),稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養(yǎng)液,吹打成細(xì)胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養(yǎng)瓶內(nèi),在37℃、5%co2及飽和濕度下培養(yǎng)。
1.2.2 細(xì)胞傳代 原代培養(yǎng)的hek-293細(xì)胞48h換液1次,細(xì)胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養(yǎng)瓶再用手掌輕輕敲打使細(xì)胞脫壁、懸浮、分散,為使細(xì)胞進(jìn)一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細(xì)胞懸液,然后加入倍量的培養(yǎng)基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴(kuò)增細(xì)胞。
1.3 細(xì)胞形態(tài)的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細(xì)胞的生長情況及形態(tài)特征。
1.4 細(xì)胞的計(jì)數(shù) 常規(guī)消化細(xì)胞,待細(xì)胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養(yǎng)基離心,再用pbs重懸并吹打制成細(xì)胞懸液。在細(xì)胞計(jì)數(shù)板蓋玻片的一側(cè)加微量細(xì)胞懸液,用10×物鏡觀察計(jì)數(shù)板四角大方格細(xì)胞數(shù),按公式計(jì)算出細(xì)胞數(shù)。細(xì)胞數(shù)/ml原液=(四方格細(xì)胞數(shù)之和/4) ×104。
1.5 細(xì)胞的貼壁率 指數(shù)生長期的細(xì)胞,以0.25%胰酶消化成單細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù)后分別接種于12個25cm2培養(yǎng)瓶中,每兩小時隨機(jī)取出3瓶細(xì)胞,吸除培養(yǎng)基及未貼壁細(xì)胞,加入胰消化酶消化、計(jì)數(shù)已貼壁細(xì)胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細(xì)胞數(shù)/接種細(xì)胞數(shù)) ×100%,計(jì)算貼壁率。 
1.6 生長曲線 取指數(shù)生長期的細(xì)胞用胰酶消化制成單細(xì)胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養(yǎng)基。每天隨機(jī)取3孔,計(jì)數(shù)每孔細(xì)胞的數(shù)目并計(jì)算平均值。連續(xù)計(jì)數(shù)10d,繪制細(xì)胞生長曲線
Anti-Phospho-Aurora A (p-Thr288) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠磷酸化有絲分裂激酶A抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-Gax/FITC 熒光素標(biāo)記生長終止特異性同源盒基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh CLEC2/CLEC1B C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族1成員B抗體 規(guī)格 0.2ml

Insulin Receptor(ISR) 胰島素受體(抗原) 0.5mg

H1N1 Hemagglutinin 2 英文名稱: 甲型流感病毒血凝素抗體 0.1ml

Rhesus antibody Rh TRIM6/RNF89 環(huán)指蛋白89 規(guī)格 0.2ml

Anti-Gax/FITC 熒光素標(biāo)記生長終止特異性同源盒基因抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
LKM(Human liver kidney microsome autoantibody) ELISA Kit 人抗肝腎微粒體抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 48T

Anti-IL-29/IFNL1 白細(xì)胞介素29抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh LRRC2 LRRC2蛋白抗體 規(guī)格 0.2ml

VMA(Human vanillylmandelic acid) ELISA Kit 人垂草扁桃酸 96T

phospho-RPS6KB1(Ser427) 英文名稱: 磷酸化核糖體S6蛋白激酶抗體 0.1ml

CNGA2 英文名稱: 環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗體 0.1ml

Anti-IL-29/IFNL1 白細(xì)胞介素29抗體Multi-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/PE-CY5 PE-CY5標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 0.1ml

FMNL1 英文名稱: 成蛋白相關(guān)蛋白1抗體 0.2ml

人巨細(xì)胞病毒PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白抗體 Anti-anti-HCMV PP65/HHV5 PP65 0.1ml

Anti-PARP/FITC 熒光素標(biāo)記多腺苷二磷酸多聚酶抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Phospho-Tuberin/TSC2(Ser1418) 磷酸化結(jié)節(jié)性硬化蛋白抗體 規(guī)格 0.1ml

Goat Anti-human IgA/FITC 熒光素標(biāo)記羊抗人IgAMulti-class antibodies規(guī)格: 0.3ml
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1培養(yǎng)Anti-IFNGR2/FITC 熒光素標(biāo)記干擾素-gamma受體2抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Anti-Insulin/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記胰島素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml

Rhesus antibody Rh Aromatase 芳香化酶/細(xì)胞色素P450/雌激素合成酶抗體 規(guī)格 0.1ml

Donkey Anti-human IgG/Bio 生物素標(biāo)記的驢抗人IgG 0.1ml

Genethonin 1 英文名稱: 淀粉結(jié)合域蛋白1抗體 0.2ml

Rhesus antibody Rh Rabbit Anti-Monkey IgG/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗猴IgG 規(guī)格 0.1ml

Anti-Insulin/HRP 辣根過氧化物酶標(biāo)記胰島素抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
中國倉鼠卵巢細(xì)胞K1(亞系克隆);CHO-K1培養(yǎng)懸浮細(xì)胞: 一般傳代可直接將細(xì)胞原液分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi),加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養(yǎng)基,輕輕吹勻后,分置其它培養(yǎng)瓶內(nèi)加入*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。

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