詳細介紹
人神經膠質細胞瘤細胞;U251價格懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
細胞名稱 人神經膠質細胞瘤細胞;U251價格
形態特性 成纖維細胞樣
品牌 貼壁生長
特征特性 該細胞分離一位患者的膠質母細胞瘤組織。
培養條件 MEM-EBSS:
Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C5
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
Anti-TNFSF18/GITR Ligand/FITC 熒光素標記壞死因子配體超家族成員18抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
BMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形態發生蛋白4(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
血栓調節蛋白抗體 Anti-TM 0.2ml
5HT2A Receptor 英文名稱: 5-羥色胺受體2A抗體 0.2ml
ETFA 英文名稱: 電子轉移黃素蛋白α抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-JunB(Ser79) 磷酸化活化蛋白激酶B抗體 規格 0.1ml
BMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形態發生蛋白4(抗原)Multi-class antibodies規格: 0.5mg
SPA(Human Staphylococal protein A) ELISA Kit 人葡萄球菌蛋白AMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-MCP-3/CCL7 單核細胞趨化蛋白3抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh K Cadherin 鈣粘蛋白6抗體 規格 0.2ml
Human Tetanus Antibody ELISA Kit 人破傷風抗體 96T
PTP/PTPase/CD148 英文名稱: 蛋白酪酸磷酸酶CD148抗體 0.2ml
CD226 英文名稱: CD226抗體 0.1ml
Anti-MCP-3/CCL7 單核細胞趨化蛋白3抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
TSST-1(Human toxic shock syndrome toxin) ELISA Kit 人毒性休克綜合征毒素1 96T
SUPT16H 英文名稱: 染色體特異性轉錄延伸因子抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh MRC2/CD280 巨噬細胞甘露糖受體2抗體 規格 0.1ml
MIP-1 Alpha 小鼠巨噬細胞炎性蛋白-1αMulti-class antibodies規格: 48T
Calcium Sensing Receptor 英文名稱: 鈣敏感受體1抗體 0.2ml
Anti-factor VIII(FVIII) human 第八因子相關抗原抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
EGFR 小鼠表皮生長因子受體Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-ATEXPA10 植物延長蛋白(擬南芥)Multi-class antibodies規格: 1ml
Rhesus antibody Rh MRP5/ABCC5 多藥耐藥相關蛋白5抗體 規格 0.1ml
anti-CMV IgM(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody) ELISA Kit 人抗巨細胞病毒抗體IgM 96T
Sclerostin 英文名稱: 骨形態發生抑制蛋白SOST抗體 0.2ml
C1orf94 英文名稱: 1號染色體開放閱讀框94抗體 0.2ml
Anti-ATEXPA10 植物延長蛋白(擬南芥)Multi-class antibodies規格: 1ml