詳細介紹
細胞名稱 人肺巨細胞癌高轉移細胞株;PG-BE1培養
形態特性 上皮樣
品牌 貼壁生長
特征特性 母系人肺巨細胞癌PG,單細胞克隆法分離鑒定得到的高轉移細胞株;裸鼠體內成瘤率100%,肺轉移率88%,淋巴轉移率94%。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
6傳代;2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
人肺巨細胞癌高轉移細胞株;PG-BE1培養操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Anti-USF-1/FITC 熒光素標記上游刺激因子1抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
ANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
調節活化的正常T細胞表達和分泌的因子(趨化因子) Anti-CCL5/RANTES 0.1ml
SAP97 英文名稱: 突觸相關蛋白97抗體 0.2ml
E.coli 英文名稱: 腸致病性大腸桿菌抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Histone H1(Thr146) 磷酸化組蛋白H1抗體 規格 0.1ml
ANPEN/CD13(Aminopeptidase N) 氨肽酶N抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
TrxR(Mouse thioredoxin reductase) ELISA Kit 小鼠硫氧還蛋白還原酶Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-CBL2 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Egr1 早期生長應答蛋白1抗體 規格 0.1ml
CR2/sCD21(Human Soluble Cluster of differentiation 21) ELISA Kit 人可溶性CD21 96T
Phospho-MYL(Ser19) 英文名稱: 磷酸化肌球蛋白輕鏈2抗體 0.1ml
AF10 英文名稱: 髓系、淋巴、混合系白血病易位基因10抗體 0.1ml
Anti-CBL2 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠原癌蛋白CBL2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
人2,5寡腺苷酸合成酶3(OAS3)ELISA試劑盒人96T0.78-50 ng/mL大鼠核因子κB抑制蛋白α(IKBα)ELISA試劑盒,英文名:IKBα ELISA KiISA Kit for Human Heparin cofactor 2大鼠錨定蛋白重復域蛋白1(ANKRD1)ELISA試劑盒,英文名:ANKRD1 ELISA Kit人腫瘤壞死因子受體超家族成員12A(TNFRSF12A)ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL大鼠肌球蛋白重鏈2(MYH2)ELISA試劑盒,英文名:MYH2 ELISA KiISA Kit for Human Transforming growth factor beta-3大鼠封閉蛋白3(CLDN3)ELISA試劑盒,英文名:CLDN3 ELISA Kit維生素A(Vitamin A)ELISA試劑盒通用96T0.156-10 ng/mL大鼠腸堿性磷酸酶(ALPI)ELISA試劑盒,英文名:ALPI ELISA Kit大鼠α2-HS糖蛋白(αHSG)ELISA試劑盒,英文名:αHSG ELISA Kit大鼠5-羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒,英文名:5-HT ELISA Kit
人磷脂酰肌醇-5-磷酸鹽4-激酶2γ型(PIP4K2C)ELISA試劑盒人96T78-5000 pg/mL大鼠催乳素(PRL)ELISA試劑盒,英文名:PRL ELISA Kit豚鼠白介素5(IL5)ELISA試劑盒,英文名:IL5 ELISA KiISA Kit for Human AP-1 complex subunit mu-1小鼠孕酮受體(PROGR)ELISA試劑盒,英文名:PROGR ELISA Kit人金屬肽酶含血小板反應蛋白9(ADAMTS9) ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠雄激素受體(AR)ELISA試劑盒,英文名:AR ELISA KiISA Kit for Human Arginase-1小鼠嗜酸粒細胞趨化蛋白Eotaxin 1(Eotaxin 1/CCL11)ELISA試劑盒,英文名:Eotaxin 1/CCL11 ELISA Kit人雙調蛋白(AREG)ELISA試劑盒人96T31.2-2000 pg/mL小鼠內皮素1(ET-1)ELISA試劑盒,英文名:ET-1 ELISA KiISA Kit for N(6)-Carboxymethyllysine小鼠巨噬細胞炎性蛋白3β(MIP-3β/ELC/CCL19)ELISA試劑盒,英文名:MIP-3β/ELC/CCL19 ELISA Kit
雞血清蛋白干粉 10mg/50mg 國產
WAPL 英文名稱: EBV核蛋白2抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-CDKN1B/P27kip1 (Thr198) 磷酸化P27抗體/周期素依賴激酶抑制劑抗體 規格 0.1ml
IKB Alpha (Inhibitor of KB Alpha) KB抑制蛋白α抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
phospho-DDX58 (Ser8) 英文名稱: 磷酸化DDX58抗體 0.1ml
Anti-Phospho-Acetyl CoA Carboxylase(Ser79) 磷酸化乙酰輔酶A羧化酶抗體Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Bid(Human BH3 interacting domain death agonist) ELISA Kit 人BH3結構域凋亡誘導蛋白Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-FLAG Tag(CT) FLAG Tag標簽抗體(C端)Multi-class antibodies規格: 0.1ml
Rhesus antibody Rh MEF2A 肌細胞增強因子2抗體 規格 0.1ml
AChE(Human Acetylcholinesterase) ELISA Kit 人乙酰膽堿酯酶 96T
RAIDD 英文名稱: CASP2凋亡相關蛋白抗體 0.1ml
C1orf177 英文名稱: 1號染色體開放閱讀框177抗體 0.2ml
Anti-FLAG Tag(CT) FLAG Tag標簽抗體(C端)Multi-class antibodies規格: 0.1ml