詳細介紹
細胞名稱 人外周淋巴細胞;U266B1培養
形態特性 淋巴母細胞樣
品牌 懸浮生長
特征特性 該細胞系是由N.K. Nilsson于1970年從一名53歲患有骨髓瘤男性的外周血中分離建立的。免疫學研究表明,該細胞和體內骨髓瘤細胞表達相同的免疫球蛋白。
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS
傳代方法 1:
3傳代,2-3天傳一代
傳代情況 C8
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 陰性
STR
同工酶 同工酶鑒定
染色體
使用權限 A類
人外周淋巴細胞;U266B1培養操作流程:
1.1 主要試劑與儀器:倒置相差顯微鏡(日本 olympus imt-413),co2孵箱(日本yamato it-61)。
1.2 hek-293細胞的復蘇培養傳代及凍存:
1.2.1 細胞的復蘇培養 從液氮罐中取出凍存管,立即投入37℃水浴,并不斷的搖動,使之迅速融化。 將溶解的細胞凍存管取出,用酒精消毒后打開,吸出溶有細胞的凍存液,加入事先裝好培養液(37℃預熱,8~10倍體積)離心管內,稍微吹打混勻,然后1000rpm 5min,去除上清,加入適量培養液,吹打成細胞懸液, 以1×105/ml密度接種于25cm2培養瓶內,在37℃、5%co2及飽和濕度下培養。
1.2.2 細胞傳代 原代培養的hek-293細胞48h換液1次,細胞長至60%~70%融合時,用0.25%胰酶消化1~2min,將培養瓶再用手掌輕輕敲打使細胞脫壁、懸浮、分散,為使細胞進一步分散可用吹打管輕輕吹打幾次,獲得細胞懸液,然后加入倍量的培養基,溫和混勻,吸管分裝混合液,傳代擴增細胞。
1.3 細胞形態的觀察 在倒置顯微鏡下觀察并記錄細胞的生長情況及形態特征。
1.4 細胞的計數 常規消化細胞,待細胞變圓、脫壁并浮起,加入少量培養基離心,再用pbs重懸并吹打制成細胞懸液。在細胞計數板蓋玻片的一側加微量細胞懸液,用10×物鏡觀察計數板四角大方格細胞數,按公式計算出細胞數。細胞數/ml原液=(四方格細胞數之和/4) ×104。
1.5 細胞的貼壁率 指數生長期的細胞,以0.25%胰酶消化成單細胞懸液,計數后分別接種于12個25cm2培養瓶中,每兩小時隨機取出3瓶細胞,吸除培養基及未貼壁細胞,加入胰消化酶消化、計數已貼壁細胞,取其平均值,按照公式:貼壁率(%)=(已貼壁細胞數/接種細胞數) ×100%,計算貼壁率。
1.6 生長曲線 取指數生長期的細胞用胰酶消化制成單細胞懸液,以1×104/孔接種于24孔板,每孔加入1ml培養基。每天隨機取3孔,計數每孔細胞的數目并計算平均值。連續計數10d,繪制細胞生長曲線
貼壁細胞: 對于貼壁細胞應先吸(倒)盡培養基,吸的越干凈越好,以免中和后加入的消化液,使強度減弱(或PBS洗1-3次)。50ml培養瓶加入消化液約1-3ml,按此比例進行消化,(根據經驗),晃動使消化液鋪均勻置37度培養箱約2-5分鐘,鏡下見細胞收縮變圓或少數脫落后,輕輕振動瓶底使細胞全部脫落,加入2-3ml*培養基后,輕輕吹打,使細胞基本成單個懸浮,然后分置其它無菌培養瓶內,加入*培養基后繼續培養或實驗。
懸浮細胞: 一般傳代可直接將細胞原液分置其它培養瓶內,加入*培養基繼續培養,如要高濃度可先離心1000rpm,5min后加入*培養基,輕輕吹勻后,分置其它培養瓶內加入*培養基繼續培養。需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經過了遺傳改造。
Human soluble protein 185,sp185/HER-2 ELISA Kit 人可溶性蛋白185Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-SLC16A3/MCT-4 MCT4抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Goat Anti-rat IgG/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的羊抗大鼠IgG 規格 0.1ml
TRAb ELISA Kit 大鼠抗促甲狀腺素受體抗體 96T
ASP4 英文名稱: 天冬酸蛋白酶ASP4抗體 0.2ml
BRN3B 英文名稱: 腦特定蛋白Brn3B抗體 0.1ml
Anti-SLC16A3/MCT-4 MCT4抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
VEGFR-3/Flt-4(Mouse Vascuoar endothelial cell growth factor receptor) ELISA Kit 小鼠血管內皮細胞生長因子受體-3Multi-class antibodies規格: 48T
Anti-Phospho-PBK/TOPK (Thr9) /FITC 熒光素標記磷酸化PDZ連接激酶/T-LAK細胞源蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh Donkey Anti-Goat IgG/AP 堿性磷酸酶(AP)標記的驢抗羊IgG 規格 0.1ml
PCDH1(Human Interleukin-2 receptor,IL-2R) ELISA Kit 人原鈣黏素1 96T
LDHC(Cancer,testis antigen 32) 英文名稱: 乳酸脫氫酶LDH-C(/抗原32)抗體 0.1ml
ARA24 英文名稱: 雄激素受體相關蛋白24抗體 0.2ml
Anti-Phospho-PBK/TOPK (Thr9) /FITC 熒光素標記磷酸化PDZ連接激酶/T-LAK細胞源蛋白激酶抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
人同型半胱氨酸敏感內質網泛素樣結構域蛋白成員1(HERP1) ELISA試劑盒人96T0.156-10 ng/mL小鼠骨成型蛋白2(BMP2)ELISA試劑盒,英文名:BMP2 ELISA KiISA Kit for Human Thiomorpholine-carboxylate dehydrogenase小鼠花生四烯酸(AA)ELISA試劑盒,英文名:AA ELISA KiISA Kit for Human Scavenger receptor cysteine-rich type 1 protein M130小鼠補體片斷3a(C3a)ELISA試劑盒,英文名:C3a ELISA KiISA Kit for Human C-reactive protein小鼠L-乳酸脫氫酶A鏈(LDH-A)ELISA試劑盒,英文名:LDH-A ELISA KiISA Kit for Human Cadherin-1小鼠白介素1受體拮抗劑(IL-1RA)ELISA試劑盒,英文名:IL-1RA ELISA KiISA Kit for Human Beta-defensin 1小鼠血紅蛋白(HB)ELISA試劑盒,英文名:HB ELISA KiISA Kit for Human Protein FAM151A小鼠嗜鉻蛋白B(CHGB)ELISA試劑盒,英文名:CHGB ELISA Kit
ELISA Kit for Human Heat shock protein HSP 90-alpha小鼠低密度脂蛋白受體銜接蛋白1(LDLRAP1)ELISA試劑盒,英文名:LDLRAP1 ELISA KiISA Kit for Human Phosphatidylinositol-glycan-specific phospholipase D小鼠膜鐵轉運蛋白(FPN)ELISA試劑盒,英文名:FPN ELISA KiISA Kit for Human High mobility group protein B1小鼠海藻糖酶(TREH)ELISA試劑盒,英文名:TREH ELISA KiISA Kit for Human Heterogeneous nuclear ribonucleoprotein K小鼠單核細胞趨化蛋白5(MCP5)ELISA試劑盒,英文名:MCP5 ELISA KiISA Kit for Human Interferon alpha/beta receptor 2小鼠UDP葡萄糖神經酰胺葡萄糖基轉移酶(UGCG)ELISA試劑盒,英文名:UGCG ELISA KiISA Kit for Human KiSS-1 receptor小鼠1,25-二羥基維生素D3(DHVD3)ELISA試劑盒,英文名:DHVD3 ELISA KiISA Kit for Human Lipopolysaccharide-binding protein大鼠循環免疫復合物(CIC)ELISA試劑盒,英文名:CIC ELISA Kit
兔抗羊IgG-純化抗體 1mg/10mg 國產
CHI3L2 英文名稱: 軟骨細胞蛋白39抗體 0.2ml
Rhesus antibody Rh phospho-Cortactin (Tyr466) 磷酸化皮層肌動蛋白抗體 規格 0.1ml
HCFHrp/BTA(Bladdertumor antigen)human 膀胱抗原Multi-class antibodies規格: 0.5mg
DCAF13 英文名稱: DCAF13蛋白抗體 0.2ml
Anti-2,4-D 2,4-二氯苯氧乙酸(除草劑)抗體Multi-class antibodies規格: 0.2ml
Guinea pig ovalbumin specific IgG,OVA sIgG ELISA Kit 豚鼠卵清蛋白特異性IgGMulti-class antibodies規格: 48T
Anti-Phospho-p56Dok2(Tyr142) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml
Rhesus antibody Rh CXorf36 脫羧酶蛋白體36抗體 規格 0.2ml
2,4-D/BSA 2,4-二氯苯氧乙酸偶聯血清白蛋白 1mg
Kv4.2 英文名稱: 電壓門控性鉀通道蛋白Kv4.2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh WDR79/TCAB1 端粒酶卡哈爾體蛋白抗體 規格 0.2ml
Anti-Phospho-p56Dok2(Tyr142) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化D酪氨酸激酶衰減蛋白2抗體IgGMulti-class antibodies規格: 0.2ml